Reação De Folin

metodologia a mais utilizada. O princípio do método baseia-se numa mistura contendo molibdato tungstato e ácido fosfórico ( reagente Folin- Ciocalteau), que sofre uma redução quando reage com proteínas na presença do catalisador, e produz um composto com absorção máxima em 750 nm. Chou e Goldstein 36 e Legler e cols estudaram extensivamente o mecanismo de redução do reagente de Folin- Ciocalteau por proteínas, peptídeos ou aminoácidos. Estes autores 36,37 sugerem que esta redução ocorra…

determinação de proteínas totais que utiliza o corante de “Coomassie brilliant blue” BG-250. Este método é baseado na interação entre o corante BG-250 e macromoléculas de proteínas que contém aminoácidos de cadeias laterais básicas ou aromáticas. No pH de reação, a interação entre a proteína de alto peso molecular e o corante BG-250 provoca o deslocamento do equilíbrio do corante para a forma aniônica, que absorve fortemente em 595 nm. Aplicações O método de Bradford, é mais rápido e…

ácidos carboxílicos com grupos amino em sua cadeia carbônica, existindo mais de 500 tipos de aminoácidos. Entretanto, apenas 20 desses participam das estruturas das proteínas. 3.2. Método de Lowry O principio do método de Lowry se baseia na reação do cobre (II) com a proteína em meio alcalino, posteriormente redução do reagente de fosfomolibdato-fosfotungstenato. Este reagente é composto por uma mistura contendo molibdato, tungstato e ácido fosfórico, que quando adicionado à…

minutos de reação. Com o auxílio de uma curva de calibração previamente determinada pelo método de DNS (anexo 1) pode-se determinar a atividade enzimática. 2.1. Efeito do pH na atividade da invertase A reação será realizada em diferentes tubos de ensaio contendo a solução de sacarose a 0,06 M, diluída em tampão fosfato de sódio 0,05 M (4,5ml) variando o pH (5,2 e 10). Inicialmente a solução deve ser inserida no tubo, submetida ao banho, quando a temperatura atingir a T da reação…

brasiliensis Camb., Terminalia fagifolia Mart. & Zucc., Copernicia cerifera (Miller) H.E. Moore, Cenostigma macrophyllum Tul. var. acuminata Teles Freire and Qualea grandiflora Mart. The total phenolics content of the plant extracts, determined by the Folin-Ciocalteu method, varied from 250.0 ±8,2 to 763,63 ± 13.03 mg of gallic acid equivalent/g dry EtOH extract. The antioxidant activity of extracts was evaluated using the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay system. Extract of…

Experiência I - REAÇÃO DE NINIDRINA: REAÇÃO GERAL - Solução de ninidrina a 0,2% em etanol. - Soluções dos aminoácidos Prolina e Glicina 0,1%. - A 1,0 mL da solução amostra de aminoácidos, adicionar 10 gotas de solução de ninidrina e ferver por 2 minutos. Reação positiva: Prolina coloração amarela. Demais aminoácidos: coloração azul violácea. Experiência II - REAÇÃO DE FOLIN: CARACTERIZAÇÃO DE HIDROXILA FENÓLICA - Solução de NaOH a 10%. - Reagente de Folin-Ciocalteau diluído com

concentração de enzima, o aumento da concentração de substrato causa um aumento gradual na velocidade inicial da reação catalisada. Verificou-se que a mesma aumenta até que tende a atingir um patamar. A partir daí, ela não se modifica muito, mesmo que sejam adicionadas quantidades crescentes de substrato. Essa situação é considerada como estando se aproximando da velocidade máxima da reação, uma situação em que todas as enzimas estão com substratos ligados em seus sítios ativos, formando…

determinação de proteínas totais que utiliza o corante de “Coomassie brilliant blue” BG-250. Este método é baseado na interação entre o corante BG-250 e macromoléculas de proteínas que contém aminoácidos de cadeias laterais básicas ou aromáticas. No pH de reação, a interação entre a proteína de alto peso molecular e o corante BG-250 provoca o deslocamento do equilíbrio do corante para a forma aniônica, que absorve fortemente em 595 nm. Aplicações O método de Bradford, é mais rápido e…

__________________________________________________ 4 1.1 Método de biureto ____________________________________________ 4 1.2 Método de Kjeldhal (1880) ______________________________________ 4 1.3 Método turbidimétrico _________________________________________ 4 1.4 Método de Folin – Ciocalteau (1969)______________________________ 5 1.5 Método de Lowry (1951) _______________________________________ 5 1.6 Método de Bradford (1976) ____________________________________ 5 2…

glicídios, comparando os valores de Rf com os dos padrões usados paralelamente a amostra (IAL, 2005). 1.2.3 Método de Somogyi-Nelson A determinação de açúcares pelo método de Somogyi-Nelson é baseada nas propriedades redutoras dos açúcares, pela reação da hidroxila hemiacetálica dos 6 monossacarídeos. A diferença dessa metodologia em relação a outros métodos de determinação de açúcares redutores é a sensibilidade do método, cuja faixa de determinação situa-se entre 25 e 500 mg/L. O…