T Cnicas Imunol Gicas II

II Profª Régia Lira Araraquara, 13 de março de 2015. Hemaglutinação Hemaglutinação INDIRETA - PASSIVA: PRINCÍPIO: Utiliza hemácias de aves e mamíferos que após tratadas com ácido tânico + glutaraldeído adsorvem proteínas e glicoproteínas (hemácias sensibilizadas) + Hemaglutinação passiva positiva + Hemaglutinação passiva negativa Hemaglutinação INDIRETA - PASSIVA: MÉTODO: Lâminas ou placas com fundo em U ou V Semiquantitativo (diluição do soro-amostra) 30-90 minutos (agitação) Teste controle com hemácias NÃO sensibilizadas Baixo custo, fácil obtenção, longo armazenamento  O uso de antígenos purificados aumentam Sensibilidade e Especificidade  Pode detectar IgG/IgM com uso de 2-mercapto-etanol Hemaglutinação INDIRETA - PASSIVA: Em placas Positivo (tapete) Negativo (botão) Hemaglutinação INDIRETA - PASSIVA: 2-mercapto-etanol: desagregação de IgM + IgM pentamérica + + IgM desagregada Hemaglutinação INDIRETA - PASSIVA: Tratamento com 2-mercapto-etanol: Não reagente Não tratada Reagente IgM e/ou IgG Amostra Não reagente IgM Reagente IgG Tratada Hemaglutinação INDIRETA - PASSIVA: IMPORTÂNCIA DIAGNÓSTICA  Infecções por: Trypanosoma cruzi Treponema pallidum Toxoplasma gondii  Detecção de IgM e IgG (níveis de até 0,1 mg/mL).  Pesquisa do fator reumatóide (Waaler-Rose) Uso de hemácias de carneiro sensibilizadas com IgG. Hemaglutinação TESTE DE COOMBS: Utiliza a hemaglutinação indireta para detecção de anticorpos contra Antígenos…

Reação de Precipitaçao: Interações polivalentes entre anticorpos e antígenos apresentam significância biológica. Uma concentração correta de imunecomplexos (anticorpos-antígenos interagindo polivalentemente) é denominada “zona de equivalência”. Neste contexto, os imunecomplexos formam uma extensiva rede de moléculas ligadas não covalentemente de tal forma que a maioria das moléculas de anticorpos e antígenos estará sobre a forma de complexadas em grandes massas. A reação de…

reagirá especificamente com o Ag que lhe deu origem. I- Objetivos: Determinação do título de Acs. contra determinados agentes etiológicos. Determinação de Ags através de soros com Acs conhecidos. Acompanhamento do tratamento e critério de cura até negativação das reações. Não há necessidade de se isolar o agente etiológico. II - Tipos de Reações Sorológicas: 1) REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO: Utiliza-se antígeno particulado (bactérias, hemácias) ou adsorvido em partículas de látex…

Reacao de Hemaglutinacao A reação de hemaglutinação é uma técnica para a detecção de anticorpos específicos que, quando presentes, reconhecerão antígenos na superfície de eritrócitos, causando aglutinação. Esta reação é utilizada na pesquisa de anticorpos anti-Trypanosoma cruzi, na detecção de anticorpos treponêmicos da sífilis (MHA.TP_ micro-hemaglutinação para Treponema pallidium) e na detecção de anticorpos contra antígenos nucleares. Na reação de…

imunocomplexos, pela rapidez, simplicidade de execução, possibilidade de automação e baixo custo operacional. O conhecimento da aplicação dos testes sorológicos e a interpretação correta dos resultados obtidos são fundamentais para clínicos, patologistas e laboratoristas orientarem seu trabalho visando o diagnóstico correto, associando sempre os resultados obtidos às investigações clínicas e epidemiológicas. Na pesquisa de anticorpos, os testes sorológicos têm sido utilizados com…

adquire coloração, para a detecção da proteína alvo. Se a amostra for positiva, ou seja, possuir o anticorpo, há a detecção por fluorescência. A desvantagem desse teste é que ele é possui alto custo financeiro, porém produz um resultado de alta sensibilidade e especificidade. PCR – REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE A Reação em Cadeia de Polimerase (PCR, do inglês Polymerase Chain Reaction), é uma metodologia que pode ser executada inteiramente “in vitro” sem o uso…

cabe em uma fechadura (i.e. o anticorpo). B. Ligações Não-covalentes As ligações que unem o antígeno ao sítio de ligação do anticorpo são todas não-covalentes por natureza. Elas incluem pontes de hidrogênio, ligações eletrostáticas, forças de Van der Waals e hidrofóbicas. Ligações múltiplas entre o antígeno e o anticorpo garantem que o antígeno será ligado fortemente ao anticorpo. C. Reversibilidade Uma vez que as reações antígeno-anticorpo ocorrem via ligações não-covalentes, elas…

TÉCNICAS IMUNOLÓGICAS UTILIZADAS NO DIAGNÓSTICO DAS INFECÇÕES PRECIPITAÇÃO As técnicas de imunoprecipitação, baseadas na quantificação de precipitados formados pela reação antígeno-anticorpo, começaram em 1897, Rudolf Kraus, em Viena, ralatou a precipitação que ocorria pela interação de antígenos solúveis e seus anti-soros correspondentes e, em 1905, Bechhold, na Alemanha, apresentou seus experimentos sobre imunoprecipitados em géis. A quantidade de precipitado…

vírus. Outros testes laboratoriais: inibição da hemaglutinação, que apesar do baixo custo e simples execução, seu uso vem sendo substituída por outras técnicas mais sensíveis, como aglutinação do látex, imunofluorescência e hemaglutinação passiva. pág. 5 Rubéola 2014 4.1. Métodos Laboratoriais Elisa - O ELISA (do inglês, Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) permite a detecção de anticorpos e antígenos específicos no plasma e soro sanguíneo. A reação é desenvolvida,…

especial de reação química e, como tal, sujeita a vários tipos de forças. Reconhecimento do Antígeno Superfície da Célula Em Solução CARACTERÍSTICAS Especificidade: As células do sistema imune competente sintetizam o Ac sob influência das características estruturais do Ag; Afinidade: É a capacidade de ligação do Ac com o Ag que estimula a sua síntese; Diversidade: Acs específicos sintetizados em resposta a um único determinante antigênico são diferentes entre si e têm…