Agua Sobrenadante Gel

utilizando para tanto o Kit Promega “Wizard Minipreps DNA Purification System” seguindo o protocolo descrito abaixo: Centrifugar a cultura de células em tubos eppendorf de 1,5mL por quatro minutos a 13000 rpm (rotações por minuto ). Retirar o sobrenadante de modo que apenas a massa de células fique no tubo. Ressuspender em 150L do meio 1 e aguardar 5min. O EDTA possui ação quelante aprisionando os íons Ca2+ e Mg2+ o que desestabiliza a membrana celular e promove o inchamento da…

a 65ºC durante 20 minutos no termomixer. 4- Centrifugou-se a mesma a 13000 rpm durante 5 minutos. 5- Transferiu-se o sobrenadante, contendo o DNA, para novos tubos. 6- Adicionou-se 300 l de isopropanol ao sobrenadante e inverteu-se o tubo várias vezes até visualizar os filamentos de DNA genómico. 7- Centrifugou-se a 13000 rpm durante 5 minutos. 8- Retirou-se o sobrenadante, lavou-se o “pellet” com 200 l de etanol a 70% e centrifugou-se novamente durante 2 minutos. 9- Removeu-se…

trapoeraba) 01 almofariz e 01 pistilo O2 tubos de microcentifuga Pipetas Pasteur ou conta-gotas Centrifuga Dertegente de louça (liquido ou gel) Água acidulada (2 gotas de vinagre- ou acido acético-em mais ou menos 25ml de água) 4- Procedimentos Colocou-se 3ml de água destilada acidulada (com 02 gotas de acido acético) em um almofariz.A razão para se usar água acidulada e porque o pigmento antocianina que iremos separar dos cloroplastos é rosa ou roxo em pH ácido,mas verde em…

recorrendo à técnica da lise alcalina;  TP2: Extrair, purificar, concentrar e quantificar DNA cromossómico de uma estirpe de E.coli;  TP3: Restrição dos DNAs cromossómico e plasmídico e sua visualização em gel de agarose;  TP4: Visualização do DNA cromossómico e plasmídico por electroforese em gel de agarose (fotografia tirada no Laboratório Fernanda Galo) e quantificação do peso molecular. Para averiguar do grau de pureza das amostras de DNA preparadas nas primeiras etapas do…

esportes como o cross-country provém de outras fontes como a glicose. Na verdade a creatina pode prejudicar a prática desses esportes, devido a um outro efeito da creatina - ganho de peso devido a retenção de água. (ANVISA,2008) Quando os níveis de creatina e PCr nos músculos aumenta, a água é absorvida pelas células para equilibrar a concentração entre as substâncias. Isto provoca a expansão das células musculares, tornando-as maiores, aumentando o peso. Isto ajuda a manter os músculos…

Acetato de Sódio), DNA e os RNA pequenos (principalmente tRNA) permanecem em solução, enquanto que RNA (> que 60 bases) precipita. Os ácidos nucléicos são poliânions solúveis em água. Os sais de sódio e potássio de ácidos nucléicos são insolúveis na maioria dos solventes orgânicos, incluindo numa mistura de etanol e água, mas eles não são desnaturados por solventes orgânicos. O detergente catiônico CTAB solubiliza membranas celulares, e dependendo da concentração de NaCl no tampão,…

suficiente de água, rompe-se a região cristalina e a água entra. Com a gelatinização, o amido torna-se mais facilmente acessível à ação das enzimas digestivas. A gelatinização refere-se à formação de uma pasta visco-elástica túrbida ou, em concentrações suficientemente altas, de um gel elástico opaco. Conforme passa o tempo e a temperatura diminui (na refrigeração ou congelamento, principalmente), as cadeias de amido tendem a interagir mais fortemente entre si, obrigando a água…

leiomioma uterino, utilizando-se 30mg a 40mg microssatélites Material parafinado de tecido retirado de blocos de parafina. Os blocos são desparafinizados por banhos de xilol a 65˚C, reidratados com soluções de concentrações decrescentes de ETOH e água deionizada. A extração de DNA é obtida através das etapas de lise celular, com solução Promega, digestão de proteínas por proteinase K, precipitação com proteínas com solução Promega e precipitação do DNA com ETOH 70% gelado e…

microtubos diferentes) de bactérias e coletou-se a partir de centrifugação a 14000 rpm por 2 minutos a temperatura ambiente (T.A) , sendo o sobrenadante (meio de cultivo) descartado. Foi ressuspendido o sedimento (pellet) em 1ml de tampão TE (NaCl 100mM; EDTA 50 mM e Tris-HCl 50mM pH 8,0) e centrifugou-se por 2 minutos a 14000 rpm e descartou-se o sobrenadante. Ressuspendeu-se o pellet em 300 microlitros de TE e adicionou-se 2 microlitvoros de RNAse (10 mg ∕ml) e incubou-se por 10…

estímuloresponsivos, por exemplo, poli-N-isopropilacrilamida e polímero similar à elastina (ELP, em inglês). Foram apresentados métodos de precipitação por afinidade. O primeiro deles envolve as ELPs, que são capazes de mudar de um estado solúvel em água para outro completamente hidrofóbico como resposta ao aumento da temperatura. Essa mudança de estado é reversível e conhecida como temperatura de solução crítica inferior (TSCI, ou, em inglês, LCST), podendo ser influenciada por mudanças…