Agua Sobrenadante Gel

na eletroforese em gel, foi possível a análise de padrões de restrição de DNA; substituiu-se a poliacrilamida pela agarose e passou-se a utilizar marcadores fluorescentes como o brometo de etídio para marcar as bandas de DNA nos géis de agarose. Na técnica de eletroforese (figura 1) atual a agarose fundida é vertida em uma bandeija de distribuição na qual está suspenso um pente de plástico. Assim que se resfria, a agarose endurece formando uma substância tipo geléia. O gel é…

com o objetivo de aumentar a sua vida de prateleira. O peróxido de hidrogênio produzido pela enzima atua como bactericida e pode ser removido posteriormente, usando uma outra enzima, a catalase, que transforma peróxido de hidrogênio em oxigênio e água. [3] A glucose oxidase pode ser usada como anti-microbiano em produtos de higiene oral. A cavidade oral abriga várias espécies de estreptococos, como o Streptococcus mutans, que é um importante contribuinte para a cárie dentária. O…

Recolher o sobrenadante que poderá ser congelado (80ºC) e utilizado posteriormente; 2. Após este procedimento dosar a quantidade de proteínas das amostras pelo método de Bradford. 2.0 – Preparo dos géis O tamanho da proteína a ser avaliada determinará a porosidade do gel de separação SDS/PAGE: Tamanho da protein (kDa) Porcentagem do gel 4-40 20 12-45 15 10-70 12,5 15-100 10 25-200 8 1. Separar as placas, pente(s) e espaçadores a serem utilizados na preparação…

Com o propósito de instruir o aluno nessas técnicas foi realizada a clonagem do gene MT1 de Coffea arabica (L.) em uma bactéria E. coli através de métodos rotineiros e com auxílio de quites comerciais. A análise de produtos de PCR por eletroforese em gel de agarose confirmou a presença do transgene em culturas bacterianas. 2. INTRODUÇÃO A clonagem gênica é uma ferramenta fundamental para a biologia molecular. A técnica consiste na transferência artificial de um gene de um organismo…

amostras a 12.000 g x 10 min x 4ºC; Retirar o sobrenadante e descartar o pellet; Para adipócitos, retirar o infranadante. Reservar em eppendorfs; Retirar desse homogenato, 10 µL para a dosagem de proteína; Dosar a proteína por Bradford; As amostras das células e tecidos são armazenadas no -80ºC em tampão RIPA; Calcular a quantidade de proteína a ser pipetada no gel a partir da dosagem da mesma por Bradford. Geralmente para cada poço no gel utilizamos 30 µg de…

Extracção de RNA – Método do Isotiocianato de Guanidina Análise de RNA por espectrofotometria e electroforese em gel de agarose Ana Campos nº 37293 ; Carolina Collinge nº 38296; Tânia Santos nº 37352 Sinopseooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooo- ooooooooooooo O método single step tornou-se muito utilizado para o isolamento e purificação de RNA intacto a partir de amostras biológicas de diferentes fontes. Esta técnica baseia-se em separar RNA do DNA e das proteínas

legumes, vegetais, mel, vísceras de crustáceos e no intestino de mamíferos e peixes. As condições ideais para que a bactéria assuma a forma vegetativa, produtora de toxina são: anaerobiose, pH alcalino ou próximo do neutro (4,8 a 8,5), atividade de água de 0,95 a 0,97 e temperatura ótima de 37ºC. Os tipos A e B se desenvolvem em temperaturas próximas das encontradas no solo (acima de 25º e até 40ºC), enquanto o tipo E é capaz de proliferação a partir de 3ºC. A toxina botulínica é…

11 2.2.3 – Agitação Mecânica......………………..................................................... 12 2.2.4 – Iniciadores................................................................................................ 13 2.2.5 – Efeitos Vítreo e Gel......……………….................................................... 14 2.2.6 – Vantagens e Desvantagens da Polimerização em Suspensão................... 15 2.3 – O Processo de Polimerização em Emulsão ......…........................................

facilidade de amplificação deste DNA pela técnica da reação de polimerização em cadeia (PCR). Os métodos incluíram digestão por proteinase K, seguida ou não por purificação com fenol/clorofórmio; Chelex 100® (BioRad); Insta Gene® (BioRad) e fervura em água estéril. O DNA obtido foi testado para amplificação de três fragmentos gênicos: Brain-derived neutrophic factor (764 pb), Factor V Leiden (220 pb) e Abelson (106 pb). De acordo com o comprimento do fragmento gênico estudado, da fonte…

____________________________________________________________ • • • • • • • • • • • • • • • • pentano, n-hexano ciclohexano tetracloreto de carbono tolueno benzeno diclorometano clorofórmio éter etílico acetato de etila acetona etanol metanol água piridina ácidos e bases orgânicas ácidos e bases inorgânicas A análise de cromatografia em camada delgada de drogas vegetais nos permite obter um perfil ("fingerprint") da amostra e comparar com o perfil…