Extração de DNA de material parafinado

COMUNICAÇÃO BREVE
SHORT COMMUNICATION

Protocolo da extração de DNA de material parafinado para análise de microssatélites em leiomioma

Recebido em 23/10/02
Aceito para publicação em 10/02/03

DNA extraction from paraffin material protocol in order to analyse microssatellites in uterine leiomyoma
Ericson Martins Nascimento1
Marilda Osti Spinelli1
Consuelo Junqueira Rodrigues1
Nilo Bozzini2

resumo
É apresentada a padronização de protocolo de extração de DNA de material parafinado para análise da

Instabilidade de

instabilidade de microssatélites de genes relacionados ao leiomioma uterino, utilizando-se 30mg a 40mg

microssatélites
Material parafinado

de tecido retirado de blocos de parafina. Os blocos são desparafinizados por banhos de xilol a 65˚C, reidratados com soluções de concentrações decrescentes de ETOH e água deionizada. A extração de DNA é obtida através das etapas de lise celular, com solução Promega, digestão de proteínas por proteinase K, precipitação com proteínas com solução Promega e precipitação do DNA com ETOH 70% gelado e ressuspendido com solução Promega. Este protocolo resulta em um DNA viável para uso na reação em

Rio de Janeiro, v. 39, n. 3, p. 253-255, 2003

unitermos
Leiomioma uterino

cadeia da polimerase (PCR).

253

The standardization of the protocol of the DNA extraction from paraffin material in order to analyze the instability of microsatellites in genes related to the uterine leiomyoma, using 30 to 40mg of tissue removed from paraffin blocks is presented. Desparaffin throught xilol baths to 65˚C, rehydrated with solutions of decreasing concentrations of ETOH and deionisation water. The extraction of DNA was obtained through the stages of cellular lysis, with Promega solution, digestion of proteins by Proteinase K, precipitation proteins with Promega solution and precipitation of DNA with ETOH 70% colded and ressuspended with
Promega solution. This protocol results in a viable DNA to