Biologia molecular

UMIVERDIDADE DE SAO PAULO
FACULDADE DE CIENCIAS FARMACEUTICAS
DEPARTAMENTO DE ANALISES CLÍNICAS E TOXICOLÓGICAS
LABORATORIO DE BIOLOGAI MOLECULAR ALPLICADA AO DIAGNÓSTICO

Apostila de noções de Biologia molecular

Prof. Dr. Mario H. Hirata
Profa. Dra Rosário D. C., Hirata

1999
ÍNDICE

Tópico Página

Aula número 1:
Introdução 2
Estrutura do DNA e RNA 2
Replicação, transcrição e tradução 4
Organização do genoma de eucariotos, procariotos e viral 7
Enzimas de restrição e suas aplicações 10

Aula número 2:
Extração do DNA genômico 13

Aula número 3:
Princípios de eletroforese 19
Fatores que influenciam na eletroforese 20
Tipos de suporte 22
Tipos de eletroforese 22
Aplicações da eletroforese nas técnicas moleculares 23

Aula número 4:
Reação de polimerização em cadeia (PCR) 28
Princípios da reação de PCR 28
Protocolo geral para PCR 31
Fatores que influenciam na PCR 31
Escolha de iniciadores para PCR 35

Aula número 5:
PCR no Diagnóstico das Doenças genéticas 39
Polimorfismo e mutações 39
Diagnóstico de alguns polimorfismos por PCR 41
Polimorfismo de apolipoproteína 42
Polimorfismo de receptores da LDL 44

Aula número 6:
PCR no diagnóstico de Doenças infecto-contagiosas 46
Meningites bacterianas 47
Tuberculose 50
Infecção pelo virus da Hepatite C 59
Infecção pelo virus HIV 64

Aula número 7:
PCR e RFLP na identificação de indivíduos 68

Aplicação da PCR em Laboratório Clínico e Medicina Forense

Aula número 1

Profa. Dra. Rosario Dominguez Crespo Hirata
Prof. Assoc. Mario Hiroyuki Hirata

Introdução

Os avanços nos estudos da biologia molecular em eucariotos tem contribuido significantemente para o entendimento da etiologia das doenças humanas. As técnicas de recombinação dos ácidos nucleicos têm permitido aos pesquisadores identificar os vários genes responsáveis por doenças hereditárias, avaliar os mecanismos de infecção