Enzimas

proteínas especificas para catalisar as reações químicas e as reações biológicas, interagindo com um ou alguns substratos, modificando apenas um tipo de reação química. A enzima da Urease é utilizada em procedimentos e diagnósticos clínicos, para determinação da ureia em fluídos biológicos como sangue e urina. Considerando a grande diferença da enzima e do substrato, o investimento energético para síntese de uma molécula tão grande justifica-se pela obtenção de uma estrutura muito precisa, com reentrâncias de forma apropriada e com grupos químicos localizados em posição exatos para servi a catalise. 2 OBJETIVOS Caracterizar a urease de forma geral. Inibição e especificidade da mesma e demonstrar a desnaturação proteica, observando as atividades da enzima urease e a ação dos agentes desnaturantes. Avaliar as reações de identificações para os testes; atividade, desnaturação pelo calor e pelos metais pesados e especificidades. 3 MATERIAL E MÉTODOS 3.1 Material 3.1.1 Equipamentos Geladeira, liquidificador, banho- fervente, capela. 3.1.2 Reativos Água Destilada, Urease, Tampão de Fosfato, Solução de Tampão com Tiouréia, Tampão de Ureia, Tampão sem Ureia, vermelho de Fenol, Cloreto de Mercúrio, Ácido Nítrico Concentrado 3.1.3 Vidraria Proveta, pipetador, bastão de vidro, tubos de ensaio, pisete, conta gotas 3.2 Métodos Fez-se o uso de algumas técnicas, e…

Enzimas são proteínas sintetizadas pelas células para a catalisação de reações químicas biológicas, sendo altamente específicas para determinados substratos. Esses catalisadores biológicos atuam na velocidade das reações químicas, porém não participam destas como um reagente ou um produto, não sendo consumidas na reação. Também são reguladoras de reações químicas. As enzimas podem ser desnaturadas com alterações na temperatura e pH ótimos para a reação, já que fazem parte do grupo das…

proteínas especificas para catalisar reações químicas, principalmente reações biológicas, elas aceleram significativamente as reações e não são consumidas nas mesmas. As enzimas são altamente especificas, interagindo com um ou alguns poucos substratos e catalisando apenas um tipo de reação química. Ureia A uréia possui um aspecto de cristal ou pó cristalino branco, seu ponto de fusão varia ao entorno de 132 - 135ºC, quase inodoro, com sabor salino. Tóxica, a uréia forma-se…

catalisa a hidrólise de hidroxiuréia, dihidroxiuréia e ésteres de ácido carbâmico, como a tiouréia e p-nitrofenilcarbamato. Ureases de diferentes fontes diferem nas afinidades por estes substratos, e também apresentam diferente suscetibilidade à inibidores, como ácido acetohidroxâmico, o p-hidroximercuribenzoato”. A urease ocorre em algumas bactérias e plantas, facilmente extraídas da soja e ela esta presente em animais e plantas. A urease é a catalisadora da uréia em amônia e dióxido…

enzimas, resolva as questões: 5. Explique a diferença da atividade da urease quando o tubo é aquecido a 100ºC, comparado com o tubo que foi aquecido a 37ºC. Não houve alteração no tubo a 37 graus, no tubo aquecido a 100 graus houve uma desnaturação da enzima por calor a alta temperatura fez mudanças na estrutura da enzima devido à quebra das pontes de hidrogênio, afetando suas funções fazendo com que ocorram reações diferentes quando comparada com uma antes de aquecida. Com o…

determinar a especificidade da enzima. 2. METARIAIS E MÉTODOS 2.1 MATERIAIS 2.1.1. REAÇÃO DO BIURETO • Tubos de ensaio • Água destilada • Biureto • Urease • Tripé • Tela de amianto • Bico de bunsen • Béquer de 1.000 mL • Termômetro 2.1.2. REAÇÃO DE HELLER • Tubo de ensaio • Urease • Água destilada • Ácido nítrico 2.1.3. ATIVIDADE DA ENZIMA • Tubos de ensaio • Tampão fosfato (1% ureia) • Urease • Vermelho fenol • Tripé • Tela de amianto • Bico…

presença de proteínas, enzimas, ligações peptídicas, através de diferentes reações como de Biureto, de Heller, verificar a atividade enzimática de uma substância, determinar pontos críticos como a influência do calor sobre as enzimas, a diferença de pH e por fim avaliar a especificidade dessas proteínas ao se ligarem com seus substratos. Para isso a enzima escolhida é a urease, uma enzima que catalisa a hidrólise da uréia em amônia e dióxido de carbono, esta pode ser adquirida a partir…

um grupo neutro capaz de interagir com o receptor pelas duas pontes de hidrogênio. Assim, foi necessário assegurar que o novo grupo era tão semelhante possível quanto a guanidina em termos de tamanho, forma e hidrofobicidade. Vários grupos funcionais foram testados e o sucesso foi finalmente alcançado através de um grupo de tiouréia que provou ser um ter ação antagonista fraca, sem atividade agonista. A além da basicidade, as propriedades do grupo tioureia são muito semelhantes ao…

multi-dimensional LC analysis.Denaturação e redução das proteínas After protein extraction and purification, individual polypeptides must be (i) denatured to disrupt intra- and intermolecular interactions, (ii) reduced to prevent the re-oxidation of disulfide bonds, and (iii) protected against unspecific proteolysis. This can be achieved by employing sample buffers that contain chaotropes (e.g. urea and/or thiourea), nonionic and/or zwitterionic detergents (e.g. Triton X-100 or CHAPS)…

ácidos e básicos. Outro avanço importante foi o 3 aperfeiçoamento dos métodos de preparação de amostras protéicas, os quais consistem das seguintes etapas: (1) a extração, usando-se diferentes tampões para amostras específicas; (2) a precipitação, para concentrar as proteínas e eliminar as substâncias interferentes, e (3) a solubilização destas proteínas. No que se refere às duas últimas etapas, a precipitação das proteínas a -20°C com ácido tricloroacético (TCA) a…