Relatório bioquimica

1. Introdução
1.1 Espectrofotômetro:
Detector de sistemas de cromatografia líquida, o espectrofotômetro tem como principio a Lei de Lambert-Beer. Estes detectores só são utilizados em substancias capazes de absorver o comprimento de onda UV- visível, por isso são chamados cromóforos. Para a determinação espectrofotométrica, normalmente é necessário o uso de reagentes para a conversão da espécie em uma forma que permita a medida de absorção de radiação com maior sensibilidade.
1.2 Lei de Lambert
Johann Lambert observou a relação entre a transmissão de luz e a espessura da camada do meio absorvente. Em um meio transparente homogêneo, cada camada deste meio absorvia em igual a fração de luz monocromática emitida. Enunciando a seguinte lei: "A intensidade da luz emitida decresce exponencialmente à medida que a espessura do meio absorvente aumenta aritmeticamente”.
1.3 Lei de Beer:
Wilhelm Beer em 1852 percebeu a relação existente entre a transmissão e a concentração do meio onde passa o feixe de luz. Uma certa solução absorve a luz proporcional à concentração molecular do soluto que nela encontra, isto é, "A intensidade de um feixe de luz monocromático decresce exponencialmente à medida que a concentração da substância absorvente aumenta aritmeticamente “.
1.4 Lei de Lambert-Beer
Simultaneamente as leis de Lambert e de Beer concluem que a absorbância depende da concentração da amostra e do comprimento do caminho da luz atravessado pela amostra. Tendo assim a equação:
A=c.l.ε
A=absorbância da amostra c=concentrcao da amostra, em mol/l l= caminho ótico ε=absorvidade molar

1.5 Componentes do espectrofotômetro
A luz fornecida por uma lâmpada é fracionada pelo prisma ou pelo monocromador nos comprimentos de onda que a compõem, esse comprimento de onda é dirigido para a solução na cubeta. Parte da luz é absorvida e parte transmitida, a redução da intensidade luminosa é medida pelo detector porque o sinal elétrico de saída do detector depende da