Relatório de Bioquimica

UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO
ÁREA DE BIOQUÍMICA E BIOFÍSICA
UFRPE – DMFA

RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA
CARACTERIZAÇÃO E PRECIPITAÇÃO DE PROTEÍNAS
LICENCIATURA EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS – LB3

Mikaela de Andrade dos Santos
Poliana de Barros Brandão
Rinaldo Rogério da Silva Junior
Ruana Pereira da Silva

Recife, 13 de outubro de 2014.

INTRODUÇÃO

A detecção de proteínas em materiais biológicos envolve reações especificas com determinados reativos, os quais originam substâncias coloridas que absorvem luz na região visível, permitindo a sua quantificação.
Dentre os métodos utilizados, situa-se o método do biureto, que é baseado na reação do sulfato de cobre em meio alcalino (reativo do biureto), com proteínas e peptídeos (no mínimo tripeptídeos). O nome do método provém do fato de que a uréia aquecida dará reação positiva, com desprendimento de amônia.
O método da precipitação proteica que envolve supressão de cargas sobre a superfície proteica pelos íons do sal de carga oposta, a eliminação do invólucro de água em torno da molécula proteica. Os íons do sal altamente hidrofílicos passam a competir com as cargas proteicas pelas moléculas da água, resultando na desidratação das moléculas proteicas causando a precipitação.
Essas práticas tiveram como objetivo evidenciar a presença de proteínas por meio de reações de coloração e verificar a precipitação de proteínas com e sem desnaturação.

MATERIAIS E MÉTODOS

Experimento 1: Reação de Coloração de proteínas com o reativo do biureto

MATERIAIS - Solução de proteínas (clara de ovo ou plasma sanguíneo); reativo de biureto (5 gotas de NaOH 2,5 + 3 gotas de sulfato de cobre 1%).
MÉTODOS – Em um tubo de ensaio adicionar 1,0 mL de solução de proteínas + reativo de biureto. Em outro tubo de ensaio, adicionar 1,0 mL de água destilada + 1,0 mL do reativo do biureto.