Veterinaria

Aulas Práticas de Microbiologia 09/03 Normas do Laboratório de Microbiologia 1. 2. 3. 4. 5. Limpar a bancada Antissepsia das mãos Acender a chama – isola até 15 cm (proteção) Trabalho (Análises e afins) Desinfecção da bancada e antissepsia das mãos Meios de Cultura Isolamento “in vitro” (fungos e bactérias)  Meio de cultura: meio artificial que contém as fontes nutricionais básicas para o crescimento microbiano. Fonte de carbono (glicose) Fonte de nitrogênio (proteína, Nitrogênio inorgânico) COMPOSTOS A SEREM DILUÍDOS Minerais (Fe, Mg, Cl, K, Na) Água  Classificação dos Meios Quanto ao estado físico:  Sólido (AGAR): colônias isoladas  Líquido (CALDO): isolamento microbiano  Semi-sólidos: motilidade (atividade do flagelo) o AGAR AGAR 1-4% Quanto à constituição química  Simples: nutrientes básicos  Complexos: Fontes básicas + Fator de crescimento (sangue, órgãos iofilizidos = BHI) o Agar-sangue Quanto a sua utilização:  Seletivos: p. ex. Mac Conkey, seleciona G+ ou G Indicadores: determina uma característica bioquímica  MO utilizador de lactose Isolamento de MO de diferentes lugares * Ubiquidase  Material: Swab Tubo de ensaio com água destilada Placa de Pete com Agar nutritivo 12/03

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Avaliação de semeadura Formação de colônias.    Tamanho Forma: borda da colônia (redonda ou irregular) Cor: deve-se ao pigmento produzido

 Coloração de Gram o Morfologia (positivo ou negativo) o Característica tintorial Reação a coloração de Gram Utilizam-se dois corantes, onde um será o fixador e outro o diferenciador. Os. Não mudar a ordem, nem deixar agir por mais ou menos tempo cada substância, uma vez escolhido o tempo de ação de cada agente, todos os outros deverão ter o mesmo tempo de ação! Sucessão de Corantes: 1. Cristal violeta – corante; 2. Lugol – fixador; 3. Álcool-acetona – diferenciador da parede 4. Fuccina – corante O que acontece: GRAM POSITIVA Cristal Violeta Lugol Álcool-acetona Fuccina ROXO ROXO ROXO ROXO GRAM NEGATIVA ROXO