Relatorio sobre proteinas

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  • Publicado : 16 de março de 2013
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1. INTRODUÇÃO
As proteínas são as moléculas orgânicas mais abundantes e importantes nas células e perfazem 50% ou mais de seu peso seco. São encontradas em todas as partes de todas as células, uma vez que são fundamentais sob todos os aspectos da estrutura e função celulares. Existem muitas espécies diferentes de proteínas, cada uma especializada para uma função biológica diversa. Além disso, amaior parte da informação genética é expressa pelas proteínas. Elas são formadas a partir da união de muitos aminoácidos, e possuem diversas funções nos mais diversos organismos.
A detecção de proteínas em materiais biológicos envolve reações específicas com determinados reativos, os quais originam substâncias coloridas que absorvem luz na região visível, permitindo a sua quantificação.
Nestetrabalho, identificaremos proteínas através da realização e observação de diversos experimentos simples com a clara de ovo in natura.

2. OBJETIVOS

* Caracterizar a presença de proteínas em material biológico;
* Demonstrar as reações de coloração para proteínas;
* Verificar experimentalmente a precipitação de proteínas com e sem desnaturação;
* Relacionar as observaçõespráticas com a teoria de propriedades gerais, estrutura e isolamento de proteínas.

3. MATERIAIS E MÉTODOS

3.1 Materiais utilizados
1) 9 Tubos de ensaio;
2) 1 pêra automática;
3) 2 Béqueres de 50 ml;
4) Espátula;
5) Conta gotas de 3 ml;
6) Bastão de vidro;
7) Chapa;
8) Piceta.

3.2 Reagentes utilizados
1) Solução de proteínas 10%;
2)Solução de ninhidrina 0,1%;
3) Hidróxido de sódio 2,5 mol/L;
4) Solução de sulfato de cobre a 1%;
5) Ácido tricloroacético (TCA) a 10% v/v;
6) Acetato de chumbo a 5% p/v;
7) Álcool etílico absoluto;
8) Clara de ovo “in natura”;
9) Cloreto de sódio 1mol/L;
10) Solução saturada de sulfato de amônio 76,6g% p/v
11) Água destilada.

3.3 Procedimentoexperimental

1. Solução de proteínas: prepararou-se uma solução de clara de ovo a 10% v/v em solução salina (NaCl 0,9g/100mL);

2. Solução de ninhidrina: pesou-se 100mg de ninhidrina e dissolvu-ser em 100 mL de tampão fosfato 0,01mol/L, pH 7,0. Conservou-se em frasco escuro e em geladeira.

3. Preparou-se a solução de hidróxido de sódio 2,5 mol/L através do volume encontrado na equaçãoabaixo:

m1v1 = m2v2
5 . v1 = 2,5 . 0,1
V1 = 50 mL

I. Reações de coloração

- Reação da Ninhidrina
Tubo 1: 2 mL de ninhidrina + 5 gotas de proteína 10%, banho-maria por 5 min, a 100°C.

- Reação do Biureto
Tubo 2: 1mL de proteína 10% + 5 gotas de NaOH 2,5 mol/L e 3 gotas de sulfato de cobre a 1%.
Tubo 3: 1 mL de água destilada + 5 gotas de NaOH 2,5 mol/L e 3 gotas de sulfato de cobre a1%.

II. Reações de precipitação

- Ação de calor
Tubo 4: 2 mL de proteína 10%, aquecer em banho-maria a 100°C por 3 min.

-Reação com reagentes para alcalóides
Tubo 5: 1 mL de proteína 10% + 1 mL de TCA 10%.

-Reação com sais de metais pesados
Tubo 6: 1 mL de proteína 10% + 1 mL de acetato de chumbo 5%.

-Reação com solventes orgânicos
Tubo 7: 1 mL de proteína 10% + 3 mL deálcool etílico.

-Efeito da adição de sais
Tubo 8: 3 mL de clara in natura + agua destilada. Agitar com o bastão até a formação de precipitado esbranquiçado. Dissolver com auxilio de um bastão, adicionar NaCl 1mol/L gota a gota até o precipitado dissolver.
Tubo 9: 2 mL da solução anterior + 4 mL de solução saturada de sulfato de amônio. Observar. Adicionar 4 a 6 mL de água destilada.

4.RESULTADOS E DISCUSSÕES
Dentre os métodos utilizados para caracterização de proteínas situa-se o método do biureto, que é baseado na reação do sulfato de cobre em meio alcalino (reativo do biureto), com proteínas e peptídeos. O nome do método provém do fato de que a uréia aquecida dará reação positiva, com desprendimento de amônia.
O método da precipitação protéica que envolve supressão de cargas...
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