produção de enzimas 1

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
FACULDADE DE ENGENHARIA DE ALIMENTOS
TA 610 - TRANSFORMAÇÕES BIOQUÍMICAS EM ALIMENTOS

Assunto: Isolamento de Microrganismos Produtores de Enzimas Amilolíticas e Produção de Enzima Invertase de Aspergillus niger por fermentação semi-sólida

Metodologia:

Isolamento de microrganismos produtores de enzimas amilolíticas de amostra de terra

Material: Uma placa de petri contendo agar nutriente contendo 0,5% de amido. Um tubo de ensaio contendo 10ml de água destilada esterilizada. Amostra de Terra.

a1- Adicionar aproximadamente 1 colher pequena cheia de terra em tubo contendo 10ml de água esterilizada. Agitar e deixar em repouso por 5 minutos.

a2- Inocular com alça o líquido sobrenadante, por esgotamento, em placa de Petri contendo ágar nutriente + 0,5% amido.

a3-Embrulhar a placa com papel amarelo e escrever o nome dos integrantes do grupo e a temperatura a ser incubada (30oC).

a4- Incubar a placa a 30oC por 24 horas. (Após a incubação a placa será guardada na geladeira até a próxima aula).

Ilustração da produção de enzimas amilolíticas desramificantes por microrganismos

Material: Uma placa de petri contendo agar nutriente contendo 0,5% de amilopectina.
Tubo de cultura da linhagem A (Flavobacterium sp) .

A1- Repicar, assepticamente, a linhagem A a placa contendo Agar Nutriente + 0,5 % de amilopectina. ( Repicar com alça de níquel cromo na forma da letra A), perto da chama do bico de Bunsen).

A2- Embrulhar a placa com papel amarelo e escrever o nome dos integrantes do grupo e a temperatura a ser incubada.

A3- Incubar a placa de meio de cultura a 27oC - 28oC por 48 horas. (Após a incubação a placa será guardada na geladeira até a próxima aula).

Resultados:

Após desenvolvimento satisfatório das colônias, observar halo de hidrólise do amido ao redor das colônias. (Nota: nesta etapa, para isolamento de microrganismos, as colônias que apresentam halo de hidrólise são repicadas para tubos contendo ágar