Electroforese - explicação e relatórios
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MÓDULO IElectroforese
Electroforese:
uma técnica electrizante
Laboratório Virtual de Biotecnologia
Introdução
moléculas de DNA que se encontrem
A electroforese é uma das técnicas
em
suspensão
numa
solução
básicas da Biologia molecular e é uma
electrolítica (isto é, que possua iões
das mais utilizadas pelos cientistas no
livres) podem ser separadas através
seu
técnica
da aplicação de uma dada voltagem.
permite a separação de moléculas de
No final do processo, as cadeias de
diferentes tamanhos. Antes do seu
DNA
aparecimento,
de
(eléctrodo
fragmentos de DNA, por exemplo, era
moléculas
feita
entanto, o objectivo desta técnica é
trabalho
diário.
a
separação
recorrendo
laborioso:
a
Esta
a
um
método
ultracentrifugação
por
estarão
separar
próximas
de
os
carga
ânodo
que
positivo),
do
atrai
negativa.
fragmentos
de
No
várias
velocidade de sedimentação. Neste
moléculas por tamanho. A solução é
método, as amostras de DNA eram
“peneirar” esses fragmentos utilizando
sujeitas a uma centrifugação de alta
para esse efeito crivos moleculares.
velocidade envoltas num gradiente de
As
sal
através
ou
açúcar
que
separava
os
fragmentos por tamanho. electroforese poliacrilamida
em
pela
corrente
gel
de
dos poros do crivo, passam ou são retidas. O crivo utilizado é o gel de agarose separar
solidificar, este gel forma uma rede
fragmentos de DNA. A partir daí esta
através da qual passam as moléculas
técnica disseminou-se de tal modo
de DNA.
e
rápida
uma
crivo
“empurradas”
técnica
simples
como
desse
são
eléctrica, e, de acordo com o tamanho
Em 1970, Daniel Nathans utilizou a moléculas
para
ou
de
poliacrilamida.
Ao
que, actualmente, ela é utilizada em
Para que se possa utilizar esta
virtualmente todos os laboratórios de
técnica, é necessário montar todo o
biologia molecular.
material necessário:
Primeiro, é necessário preparar o gel
O que é a electroforese?
de agarose (mais utilizado