precipitaçao de proteinas

REAÇÕES DE COLORAÇÃO E PRECIPITAÇÃO DE PROTEÍNAS

REAÇÕES DE COLORAÇÃO

1. SEPARAÇÃO DA CASEÍNA DO LEITE:

TÉCNICA:
Coloque 20mL de leite em um béquer de 100 mL e acrescente agitando: 7 mL de solução de ácido acético em torno de 1N. Deixe em repouso por um minuto. Filtre em tecido de algodão e esprema para eliminar toda a água.

2.SOLUÇÃO DE CASEÍNA
Retire uma pequena porção de caseína (coágulo) e coloque em um tubo de ensaio. Acrescente 10mL de água esmague com bastão. Junte 5mL de solução de NaOH em torno de 2N e agite até obter solubilização.

Conclusão: As caseínas são um grupo de proteínas que compõem cerca de 80% de todas as proteínas do leite. Elas também podem ser classificadas como polímeros naturais. A caseína não coagula com o calor. É precipitada pelos ácidos ou pela renina. No caso deste experimento a coagulação é feita com o ácido acético. Quando o ácido acético é adicionado, a variação do PH diminui, alterando assim o ponto isoelétrico, tornando a caseína insolúvel. Quando adicionado o Hidróxido de sódio ao tubo de ensaio contendo água destilada e caseína, observa-se que a caseína volta ao seu estado de solubilidade, voltando ao seu ponto isoelétrico, por isso a solução se apresenta homogênea visivelmente.

3.REAÇÃO DO BIURETO (PESQUISA DE LIGAÇÃO PEPTÍDICA)
TÉCNICA:
Coloque 2mL do reagente de Biureto em cada um dos três tubos abaixo.
Tubo1: 1 mL da solução de caseína; Tubo 2: 1 mL da solução de ovoalbumina; Tubo 3: 1 mL da solução de glicina a 0,1N.
Conclusão: O reagente de biureto é um reagente analítico feito de hidróxido de potássio (KOH) e sulfato de cobre (II) (CuSO4), junto com tartarato de sódio e potássio (KNaC4H4O6·4H2O). Este reagente de coloração azul torna-se violeta na presença de proteínas, e muda para rosa quando combinado com polipeptídeos de cadeia curta.
No tubo 1 foi observada uma pequena mudança de cor para violeta claro, porque foram identificadas algumas ligações peptídicas.
No tubo 2, ocorreu uma mudança