Precipitacao De Proteinas

Precipitação de proteínas

As proteínas são identificadas por meio de reações de precipitação e reações de coloração. Neste trabalho serão executadas reações com proteínas do leite, que se obtém separando-se a caseína por precipitação, restando o soro que contém os outros componentes do leite.
A precipitação da caseína nada mais é do que a preparação da coalhada ou iogurte. Essa precipitação ocorre quando o pH do leite abaixa até atingir o pI (ponto isoelétrico) da caseína, que é: pHi = 4,6.
Em pH 4,6 as cargas elétricas da molécula da caseína se equivalem, isto é, existe igual quantidade de cargas elétricas positivas e negativas e nesta condição a caseína se precipita. Cada proteína tem o seu ponto isoelétrico característico.
O abaixamento do pH pode se processar:
a. quimicamente : pela adição de ácidos (acético, cítrico, lático, etc.) ao leite, lentamente (gota a gota) até que se verifique a formação do coágulo. Isto deve ser feito com agitação e a uma temperatura de 42 C.
b. microbiologicamente: pela contaminação do leite com uma cultura de microrganismos que produzem ácidos. Qualquer microrganismo que produza ácidos pode ser utilizado para o preparo do iogurte, ou seja, para a precipitação da caseína.
Pode-se utilizar, por exemplo, pastilhas ou injeções de lactobês, lactosin (que são culturas de lactobacilos). A temperatura também precisa ser conservada durante umas
4 horas a 42 C. Conforme a cultura utilizada, o iogurte terá um sabor diferente.
Para a alimentação, o iogurte preparado microbiologicamente, tem maior valor nutritivo, porque além das proteínas do leite existem os microrganismos.
Objetivos:
Realizar a separação de uma das proteínas do leite, a caseína, através de precipitação no ponto isoelétrico.
Precipitar proteínas do soro obtido a partir do leite, com o uso de alcaloides.
Procedimento:
1. Extração da caseína
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Preparar um banho-maria a 42º C.
Preparar uma diluição de 100 mL de leite e 100 mL de água.
Deixar o leite em banho-maria