Parâmetros cinéticos da enzima invertase

Universidade Federal de Uberlândia
Faculdade de Engenharia Química
Laboratório de Engenharia Química 2
Módulo 1 - Bioquímica

Atividade da Enzima
Invertase

Alunas: Laryssa Christina Batista Cordeiro
Lidiane Pereira Bessa
Lorrana Queiroz Ramos
Kimberly de Freitas Oliveira

Módulo 1
• Prática I - Determinação de Parâmetros Cinéticos de Reação
Enzimática
• Prática II - Influência do pH na Atividade Enzimática
• Prática III - Influência da Temperatura na Atividade Enzimática

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Objetivos
• Prática I – Parâmetros Cinéticos
- Determinar os parâmetros cinéticos (Vmáx e Km) da hidrólise da sacarose pela enzima invertase, utilizando o método de LineweaverBurk, à temperatura e pH constante.
• Prática II – Influência do pH
- Verificar a influência do pH sobre o desempenho da enzima invertase na catálise da reação de hidrólise da sacarose;
- Determinar o melhor pH para que a reação enzimática seja favorecida à temperatura e concentração constantes.
• Prática III – Influência da temperatura
- Verificar a influência da temperatura sobre o desempenho da enzima invertase na reação de hidrólise da sacarose.
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Enzimas
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Catalizador orgânico com estruturas específicas;
Responsável pela reação;
Regenerada ao término da reação;
Mais sensíveis à variação de temperatura, podendo desnaturar-se;
Utilização na indústria alimentícia, de fermentação, farmacêutica, tratamento de efluentes etc…

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Invertase
• Foi a primeira proteína a ser identificada como um biocatalisador
• Enzima que catalisa a reação de hidrólise da sacarose
• Produz uma mistura equimolar de glicose e frutose
• Pode ser obtida de diferentes microrganismos
• Pesquisas referentes a esta enzima estudam, principalmente, invertase extracelular 5

Reação Enzimática Estudada
• Reação de hidrólise ou inversão de sacarose;

• Reação de inversão: monossacarídeos desviam a luz polarizada para esquerda e a sacarose desvia para direita;
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Materiais
 Água Destilada
 Solução de NaOH (80 g/L)
 DNS [ácido 3,5