espectrofotometria

Páginas: 5 (1090 palavras) Publicado: 27 de novembro de 2013
Aula 7
Instrumentação na Espectrofotometria

Prof. Marcio
Outubro de 2013l

Instrumentação
ESPECTROFOTÔMETRO UV-Visível
É um equipamento eletromecânico de análise quantitativa,
microprocessado

que

utiliza

radiação

eletromagnética

no

comprimento de onda da luz visível até ultravioleta, ideal para várias

aplicações tais como:
 Petroquímica;
 Bioquímica;
 Análiseambiental;
 Análise de alimentos e medicamentos;
Análise de resíduos e de água.

Introdução

 Compostos cromóforos: absorvem energia e liberam com

facilidade na forma de luz.
Os compostos orgânicos são muitas vezes exemplos de substâncias
cromofilas.
 O primeiro passo é determinar

em qual comprimento de onda a
substância presente na amostra
vai absorver mais a luz incidente. Instrumentação

 Fonte de radiação:

1. Lâmpada de deutério (isótopo do hidrogênio):
Faixa da radiação no ultravioleta (180-400nm).

2. Lâmpada de tungstênio (metal):
Faixa de radiação no ultravioleta-visível

(180-1000nm).

Instrumentação

 Monocromador:

Isola o comprimento de onda de interesse e elimina a radiação não
desejada.

Instrumentação

Compartimento daamostra:

Acomoda a cubeta com a solução da amostra em uma posição em
frente ao feixe que ira sair do monocromador.

Detector:

Instrumentação

Transforma sinal luminoso em sinal elétrico que é interpretado como
picos no espectrograma.

Instrumentação

Microprocessador ou transdutor:

Converte o sinal elétrico em uma leitura digital usando dados
característicos de umespectrograma.

Display:

Instrumentação

Visor de resultados de absorbância, transmitância ou concentração.

“Antigamente os espectrofotômetros usavam a transmitância em
seus gráficos e cálculos . Hoje em dia os instrumentos
espectroscópicos modernos utilizam mais a absorbância.”
“Como a amostra é colocada geralmente dentro de células
chamadas cubetas. Ocorrem muitas perdas por causa deefeitos

de reflexão e espalhamento no espectrofotômetro. Para minimizar
usamos uma solução somente com o solvente chamada solução
branco para descontar do valor total medido na solução amostra.”

Calibração e Padronização
A calibração é uma parte muito importante de praticamente
todo método analítico quantitativo.

Pois determina a relação entre a resposta analítica e a
concentração doanalito.
É realizada pelo uso de

Soluções padrões

 Como uma dosagem tem a finalidade primordial de avaliar
quantidades, é importante usar a calibração visando à obtenção
de resultados exatos.

 Para tal usamos tanto as soluções padrões como as soluções

branco:
1. Solução padrão: apresenta uma concentração exata de uma
substância que servirá como referência na determinaçãoanalítica da quantidade desconhecida da substância.
2. Solução branco: usada para estabelecer o zero da
absorbância necessário por causa das perdas advindas da
reflexão e refração na própria cubeta e principalmente pela
absorção do solvente.

Comparação com Padrões
A técnica de comparação direta

Se a concentração do analito
excede ou é menor que a de
um dos padrões

na maioria dosprocedimentos
por comparação é determinada

Procedimento analítico que compara uma propriedade do
analito com os padrões, de maneira que a propriedade que
está sendo avaliada se iguale com aquela do padrão.

Comparação com Padrões
Solução padrão externo: preparada separadamente da amostra.

Portanto uma série de padrões externos contendo o analito em
concentração conhecida é preparada.

0,2510,455

0,1mol/L

0,2mol/L

0,672

0,3mol/L

0,896

Absorbância

0,4mol/L

Figura 1 – Tubos de ensaio com soluções com quantidade de analito crescente.

Calibração e Padronização
A calibração

é

realizada

obtendo-se

o

sinal

de

resposta

(absorbância) como função da concentração do analito.
A
0,896
0,672

0,455
0,251

0,1

0,2

0,3 0,4...
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