DM funcionais DNA

Domínios funcionais das DNA binding proteins DNA binding proteins Identificação da periferia da molécula de DNA por proteínas Interações comuns entre aminoácidos e bases nucleotídicas especialmente no sulco maior da cadeia de DNA "major groove" Domínios comuns de ligação ao DNA Helix-turn-helix Homeodomain Zinc-finger Leucine zipper Basic helix-loop-helix Interação de b-sheets com a dupla hélice do DNA Interação de cadeias polipeptídicas com a dupla hélice do DNA Heterodímeros Bibliografia Lodish 7ª Ed. Alberts, 5ª Ed. Ainda recorrendo à espectrofotometria, calculámos o grau de pureza da amostra. A partir de radiações com comprimentos de onda de 260 nm (comprimento de onda para o qual é máxima a radiação absorvida pelo DNA genómico) e de 280 nm (comprimento de onda para o qual é máxima a radiação absorvida por proteínas, por exemplo histonas e DNases) é possível determinar a absorvância de ácidos nucleicos e proteínas e depois calcular o grau de pureza. Sendo o DNA a substância em foco na atividadeRelatório de Genética Molecular | Docente: Filipe Monteiro Trabalhos práticos 1 e 2 Objetivos do Trabalho Prático: Extração de DNA genómico de células hepáticas (maceração de uma porção do fígado) de ratinho , quantificação da sua concentração e do seu grau de pureza (espetrofotometria) (prática 1); Amplificação, por PCR (Polimerase Chain Reaction), de fragmentos do DNA genómico extraído (genes Drg11 e LacZ delimitados por primers) (prática

EXTRAÇÃO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS Professor: Chris,an Reis Disciplina: Biologia Molecular O que é extração/purificação? A CÉLULA E SEU MATERIAL GENÉTICO ROMPIMENTO DAS MEMBRANAS LIBERAÇÃO DO MATERIAL NO MEIO PURIFICA ÇÃO DO MATERIAL OBTIDO Quais são os requisitos essenciais para a obtenção dos ácidos nucléicos? • quan&dade…

Extracção, Quantificação e Análise de Integridade de DNA FCT /UNL, DCV, TLBII 2013-2014 Extracção, Quantificação e Análise de Integridade de DNA FCT /UNL, DCV, TLBII Catarina Borges, Inês Barroso, Sara Garcia Abstract The objective of the following report was the extraction, quantification and analysis of the plasmid DNA in order to know about it’s purity. The extraction was achieved by the alkaline lysis method, the analysis was made by agarose gel 1.2 %…

Aula nº1 – Extracção não enzimática de DNA de leucócitos a partir de sangue Objectivo  Extracção de DNA dos glóbulos brancos, a partir de sangue;  Extracção é feita a partir de glóbulos brancos uma vez que glóbulos vermelhos adultos já não têm núcleo. Reagentes utilizados Tampão TKM-1  Tris-HCl - Tampão que mantém pH estável  MgCl2 - Dissocia-se em co-iões - Catiões aos grupos fosfatos protegendo a integridade do DNA  EDTA - Impede a acção das nucleases - Agente…

quantificação do DNA plasmídeo/vector de clonagem (pUC19) de uma estirpe de Escherichia coli. Este último constitui, por assim dizer o objectivo principal de todo o trabalho, já que as todas etapas anteriores foram realizadas com a finalidade de visualisarmos o DNA e de quantificarmos o seu tamanho. Para isso, realizaram-se os seguintes trabalhos/etapas:  TP1: Extrair, purificar, concentrar e quantificar o plasmídeo/vector de clonagem (pUC19) de uma estirpe de E.coli recorrendo à…

Objetivo: Produzir e purificar DNA plasmídico a partir de Escherichia coli (E. coli) recombinante. Introdução Esta catividade laboratorial tem como intuito avaliar a quantidade e qualidade do ADN plasmídico extraído de E.Coli (pUC18). O ADN (ácido desoxirribonucleico) é o suporte universal da informação genética que define as características de cada organismo vivo cuja unidade fundamental é o nucleótido que resulta da ligação entre, uma base azotada (A-adenina, G-guanina,…

Determinação de polimorfismos no gene ECA e Genotipagem por High Resolution Melting (HRM) dos genes MYH7 exão 8 e MYBPC3 exão 23 ABSTRACT Este trabalho teve como objectivo a determinação do polimorfismo I/D da ECA (Angiotensin Converting Enzyme) e sequenciação do gene MYBPC3 exão 7 (Myosin Binding Prontein C), para o estudo de uma das principais causas da Cardiomiopatia hipertrófica, espessamento anormal do septo interventricular. Para tal, procedeu-se a realização de uma…

A descoberta do DNA ocorreu em 1869 e foi feita pelo bioquímico alemão Johann Friedrich Miescher1 (1844 – 1895). Miescher buscava determinar os componentes químicos do núcleo celular e usava os glóbulos brancos contidos no pus para suas pesquisas. Os glóbulos brancos eram um bom material pois são células que apresentam núcleos grandes e fáceis de serem isolados do citoplasma. Além disso, o pús era muito fácil de se conseguir na época em ataduras usadas em ferimentos. Analisando os…

Engenharia Genética: DNA fingerprint Índice Introdução: Engenharia Genética: Engenharia Genética é o termo utilizado para descrever algumas técnicas modernas que têm vindo a revolucionar o campo da Biotecnologia. Consiste num conjunto de técnicas e ferramentas que permite identificar, isolar, manipular e multiplicar os genes de um determinado organismo, geralmente de forma artificial. Esta…

gênicos de interesse através de seleção de colônias bacterianas com antibiótico apropriado, conforme o plasmídeo selecionado. Purificar o clone utilizando enzimas de restrição. E sequenciar o DNA para confirmar. f. Para expressão das proteínas recombinantes, utilizar linhagens de e.coli comercial, modificadas geneticamente para expressão otimizada de proteínas recombinantes. g. A confirmação da proteína recombinate secretada , será feita por eletroforese em gel de poliacrilamida…