acidos

Páginas: 4 (891 palavras) Publicado: 29 de outubro de 2014
EXTRAÇÃO
 DE
 ÁCIDOS
 
NUCLÉICOS
 
Professor:
 Chris,an
 Reis
 
Disciplina:
 Biologia
 Molecular
 

O
 
 que
 é
 extração/purificação?
 

A CÉLULAE SEU
MATERIAL
GENÉTICO

ROMPIMENTO
DAS
MEMBRANAS

LIBERAÇÃO
DO
MATERIAL
NO MEIO

PURIFICA
ÇÃO DO
MATERIAL
OBTIDO

Quais
 são
 os
 requisitos
 essenciais
 para
 a 
obtenção
 dos
 ácidos
 nucléicos?
 
 


 
• 
 quan&dade
 (rendimento)
 –
 Que
 quan&dade/
concentração
 foi
 ob&da
 de
 ácidos
 nucléicos na
 
extração?
 
• 
  pureza
  –
  os
  ácidos
  nucléicos
  foram
  ob&dos
 
com
  alto
  grau
  de
  pureza
  ou
  existem
 
contaminantes na
 amostra?
 
• 
  integridade
  –
  as
  moléculas
  de
  ácidos
 
n u c l é i c o s
  e s t ã o
  i n t e g r a s
  o u
  h o u v e
 
degradação? 

 

Quais
 são
 as
 etapas
 na
 extração/obtenção
 
de
 ácidos
 nucléicos?
 

 
•  1a
 Etapa:
 Ruptura
 ou
 lise
 celular
 

 
•  2a Etapa:
 Desnaturação
 ou
 ina&vação
 de
 
proteínas
 
 

•  3a
 Etapa:
 Separação
 dos
 ácidos
 nucléicos
 

1a
 Etapa:
 
•  Ruptura
 ou lise
 celular
 
–  Liberar
 os
 componentes
 citoplasmá,cos
 e/ou
 
nucleares
 intracelulares.
 

Técnica

Exemplo

Efeito na
membrana

Tipo celular

Baseada emenzima

Lisozima

Produz orifícios
nas membranas

Bactérias

Solução

Solução salina
hipotônica

Produz ambiente
hipotônico, que
rompe membrana
celular

Bactérias/GeralDetergente

SDS/NaOH

Solubiliza camada
lipídica

Células animais /
Bactérias

Sonicação

Ondas sonoras

Rompe
membranas
através de som de
alta freqüência

Bactérias

Homogenização...
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