Vitamina c

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mina cDeterminação de vitamina C pelo método de Tillmans
Este método é usado para amostras com baixo teor de vitamina C, por exemplo,
sucos de frutas. Baseia-se na redução do corante sal sódico de 2,6-diclorofenol indofenol por uma solução ácida de vitamina C.
Material

Microbureta, dessecador, balança analítica, papel de filtro, pipetas volumétricas de 1, 4
e 10 mL, pipetas graduadas de 5e 10 mL, provetas de 50,100, 200 e 500 mL, frasco
Erlenmeyer de 250 mL, balões volumétricos de 100 e 200 mL, funil de vidro e bastão de vidro.

Reagentes
Ácido ascórbico
Sal sódico do 2,6-diclorofenol indofenol
Solução índigo carmim a 0,5%
Solução ácida – Dissolva 15 g de ácido metafosfórico em 40 mL de ácido acético.

Adicione
450 mL de água, agite e filtre.
Solução-padrão de vitaminaC – Pese 100 mg de vitamina C, previamente dessecada,
dissolva em 100 mL de solução ácida em balão volumétrico. Dilua 10 vezes com a mesma solução ácida.

Solução de Tillmans – Dissolva 42 mg de bicarbonato de sódio em 50 mL de água. Adicione 50 mg de 2,6-diclorofenol indofenol. Agite até a dissolução do corante. Dilua até 200 mL com água em balão volumétrico e filtre.

Padronização dasolução de Tillmans – Em um frasco Erlenmeyer de 250 mL, pipete 4
mL da solução diluída da vitamina C e 6 mL da solução ácida. Adicione 50 mL de água e titule com solução de Tillmans até obter uma coloração ligeiramente rosada e estável por 15 segundos. Faça um branco, substituindo a solução de vitamina C por solução ácida e desconte no cálculo do fator. Calcule o fator (F) da solução de Tillmansconforme a relação:
Nota: armazene a solução de Tillmans em frasco escuro e na geladeira. Toda vez que usar, padronize com solução recém-preparada de vitamina C.

Procedimento
Polpas e Sucos de Frutas – Esprema a polpa da fruta e filtre através de tecido fino, limpo e seco ou em papel de filtro. Utilize, no mínimo, 10 mL do filtrado e adicione igual volume de solução ácida. Agite, filtre e tituleuma alíquota de 10 mL do filtrado conforme descrito na padronização da solução de Tillmans. Faça um branco constituído de 10 mL da solução ácida e com volume de água igual ao da solução do corante gasto na titulação da amostra e titule.
Os íons Fe2+, Sn 2+ e Cu2+ presentes na amostra a ser analisada, interferem neste método.
Nestes casos, previamente à determinação da vitamina C verifique apresença dos
interferentes, procedendo como descrito: adicione duas gotas da solução de azul de
metileno 0,05% a 10 mL da mistura 1:1 constituída da amostra de suco e do reagente
ácido. O desaparecimento da cor do azul de metileno em 5 a 10 segundos indica a presença das substâncias interferentes. Pode-se também verificar a presença dos íons interferentes, adicionando-se a 10 mL da amostra o mesmovolume da solução de HCl (1+3) e cinco gotas de índigo carmim a 0,05%. O desaparecimento da cor em 5-10 segundos indica a presença de substâncias redutoras.
Cálculo
V = volume da solução de Tillmans gasto na titulação
F = fator da solução de Tillmans
A = mL da amostra utilizada

Determinação espectrofotométrica de vitamina C por redução de íons cúpricos
Este método é aplicável para aquantificação de ácido ascórbico (vitamina C), em
baixas concentrações em alimentos pigmentados, naturais e industrializados.
Material
Espectrofotômetro UV/VIS com cubetas de 1 cm de espessura, liqüidificador, agitador
mecânico, balança analítica, béqueres de 50 e 100 mL, pipetas graduadas de 1, 2, 5
e 10 mL, pipetas volumétricas de 1, 2, 5 e 10 mL, provetas de 50 e 100 mL, balões
volumétricos de 50e 100 mL, funil de vidro, provetas de 25 e 50 mL com tampa, frasco
Erlenmeyer de 250 mL com tampa e frasco Erlenmeyer de 25 mL.
Reagentes
Acetato de sódio
2,2’-Biquinoleína (cuproína)
Tolueno
Álcool isoamílico
Ácido sulfúrico
Ácido ascórbico padrão
Uréia
Clorofórmio
Álcool
Acetato de cobre (II) mono-hidratado
Solução de ácido metafosfórico a 5% m/v
Solução A (Branco) – Pipete 2...
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