Validacao

Quim. Nova, Vol. 32, No. 4, 1021-1030, 2009 Validação em métodos cromatográficos para análises de pequenas moléculas em matrizes biológicas neila maria cassiano, Juliana cristina barreiro, lúcia regina rocha martins, regina Vincenzi oliveira e quezia bezerra cass* Departamento de Química, Universidade Federal de São Carlos, CP 676, 13560-970 São Carlos - SP, Brasil Recebido em 23/4/08; aceito em 11/9/08; publicado na web em 2/2/09

CHROMATOGRAPHIC METHODS VALIDATION FOR ANALYSIS OF SMALL MOLECULES IN BIOLOGICAL MATRICES. Chromatographic methods are commonly used for analysis of small molecules in different biological matrices. An important step to be considered upon a bioanalytical method’s development is the capacity to yield reliable and reproducible results. This review discusses validation procedures adopted by different governmental agencies, such as Food and Drug Administration (USA), European Union (EU) and Agência Nacional de Vigilância Sanitária (BR) for quantification of small molecules by bioanalytical chromatographic methods. The main parameters addressed in this review are: selectivity, linearity, precision, accuracy, quantification and detection limits, recovery, dilution integrity, stability and robustness. Also, the acceptance criterions are clearly specified.

Keywords: chromatography; bioanalytical method validation; figures of merit.

introdução A validação de métodos cromatográficos para a quantificação de compostos endógenos ou exógenos em matrizes biológicas tem sido tema de discussão em conferências e artigos científicos. Representantes da comunidade científica, das indústrias e agências reguladoras do Brasil (ANVISA), EUA (US-FDA) e Europa (EU) definiram os parâmetros de validação, que posteriormente foram uniformizados pela ICH (International Conference on Harmonization). As agências reguladoras disponibilizam guias para a validação de métodos bioanalíticos,1-3 sendo que tais documentos usualmente sugerem as diretrizes a serem