TP3 Apresenta O
322 palavras
2 páginas
24-03-2015Separar e identificar várias biomoléculas com cromatografia em camada fina.
Configuração cis
CO2H
Ácido Oleico (ácido gordo)
Parte polar
Bioquímica Geral 2009-2010.
24-03-2015
Glicerol
O
O
O
O
H
O
O
Trioleína (Triacilglicerol)
Grupo acilo
O
R1
Um éster
O R
Bioquímica Geral 2009-2010.
24-03-2015
Cadeia lateral
Grupo funcional hidroxilo
C
A
D
B
Parte apolar
HO
Colesterol (um esteróide)
Parte polar
Bioquímica Geral 2009-2010.
24-03-2015
Hidrofóbico
C
A
O
O
Oleato de Colesterol
Bioquímica Geral 2009-2010.
24-03-2015
B
D
Cromatografia
Desenvolvida por Michail Tswett 1906.
Método separativo usando um sistema bifásica, fase líquida e fase sólida
(adsorção).
Bioquímica Geral 2009-2010.
24-03-2015
Ligação não-covalente
S
S
S
E
A1
S
S
E
E
S
HO O
OH Si
HO Si O
Si O
Grupo Silanol
A1 e A2 são analitos
S = Suporte
E = Eluente
A2
S
A1
S
A2
S
S
FASE ESTACIONÁRIA
FASE MÓVEL
Tf
To
E
Bioquímica Geral 2009-2010.
A2
24-03-2015
A1
Placa de camada fina
Cromatografia em camada fina.
O Rf – factor de retenção Rf = 0,67
Distância percorrida pelo eluente (cm)
Rf = 0,40
Rf = Distância percorrida pelo soluto (cm)/Distância percorrida pelo eluente
(cm)
Bioquímica Geral 2009-2010.
A
B
Analitos
24-03-2015
Distância percorrida pelo analito
Mistura de 3 analitos
Identificação
Rf = 0,82
Rf = 0,80
Rf = 0,40
Rf = 0,20
Rf = 0,40
Rf = 0,28
A
B
C
Mistura
Padrões
Bioquímica Geral 2009-2010.
24-03-2015
Visualização
Vapores de I2 (Iodo)
R
R1
I2
R
I
Grupo funcional presente em todos os analitos
Bioquímica Geral 2009-2010.
R1
I
Cor característica
24-03-2015
Eluente (fase móvel; f.m.)= 85% Hexano,
15% Et2O e 1% AcOH (Apolar)
Fase estacionária (f.e.) = SiO4 (Silica geL)
(Polar).
Os compostos polares têm preferência para a f.e.
Os compostos apolares têm preferência para a f.m.
Bioquímica Geral 2009-2010.
24-03-2015