Schistosoma mansoni - Diagnóstico PCR

Biologia Molecular
Flávio Marcos Gomes Araújo
Bruna Cunha, Izabela Machado, Jacqueline Fernanda, Joelma Silva, Karine Amanda,
Lorena Teixeira, Lucas Pires, Nathalia Fernanda, Ramon Mendanha, Thaiza Leal .

Introdução
• 200 milhões no mundo;
• 700 milhões de pessoas vivem em uma área endêmica em 76 países;
• Brasil 6-8.000.000 estão infectadas e 26 milhões estão em áreas de risco;

• Elevada especificidade e sensibilidade;
• 10x mais sensível que o método Kato-katz;

• Método direto;
• Maior sensibilidade; • Analise quantitativa; Materiais: Kato-Katz

 Métodos e Materiais
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Área de estudo:

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População de estudo:

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Kato-Katz técnica:

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Extração de DNA:

Este estudo foi realizado nos municípios de Piau e
Coronel Pacheco. Todas as amostras foram coletadas de janeiro a abril de
2007;
219 habitantes de Piau e Coronel Pacheco;
48,9% eram do sexo feminino e 51,1% eram do sexo masculino. As idades dos participantes variou de um - 90 anos (média de idade = 38 anos);
Duas lâminas foram preparados a partir de cada amostra de fezes pelo método de Kato-Katz;
O DNA total foi extraído a partir de 500 mg de cada amostra fecal utilizando QIAamp DNA Stool Mini Kit. A concentração e a pureza do DNA foram determinadas por meio de medições de absorvência a
A260 e A280 utilizando um espectrofotómetro;

• A amplificação de DNA do S. mansoni: A PCR foi realizada num volume final de 20 μ L, contendo o seguinte:
20mM
8,4
50mM

Tris-HCl pH MgCl2

0,6 μ M
0,3 μ M
1,5mM
0,75 unidades

Primer dNTP’s KCl
Taq-polimerase

•

Os produtos de PCR foram sujeitos a eletroforese em géis de poliacrilamida a 6% e analisados após coloração com prata.

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Análise estatística: SPSS pacote de software estatístico 14.0,
Microsoft Excel (2010);

Resultados

Discussão
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Este trabalho analisou PCR como uma técnica de diagnóstico de esquistossomose em regiões com baixa endemicidade;

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Positivos foram: 7,3% utilizando Kato-katz;
34,7%, utilizando as técnicas de PCR;

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