Microscopia

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Citologia e Histologia Geral

MICROSCOPIA

Métodos de estudo

MICROSCOPIA
ÓPTICA (de luz)

1

Resolução:
Menor distância para que duas partículas
apareçam como objetos separadosAbertura numérica das objetivas e limite de resolução
conseguido com os microscópios utilizados nas aulas práticas
de Citologia e Histologia Geral.

Características

LR = K (0,61) X λ (comp. de onda= 0,55)
AN (na objetiva)

Objetiva de
imersão

Limite de resolução (μm)

4x
40x
0,10
3,36

10x
100x
0,25
1,34

40x
400x
0,65
0,52

100x
1000x
1,25
0,27

Distância entreobjetiva e o
espécime (mm)

29,0

6,30

0,53

0,29

Ampliação da objetiva

Limite de Resolução:

Lentes objetivas “a seco”

Ampliação total*
Abertura numérica (AN)

Maior A.N. =Menor L.R. = ↑ resolução.

Células da bochecha (sem corantes)

Cloroplastos
em espiral
(alga verde)

TÉCNICAS
Microscopia de luz:

Etapas:
Coleta
Fixação

Observação à fresco.
Preparaçãode material permanente.

Desidratação
Clareamento ou Diafanização
Inclusão
Corte
Montagem e Coloração
Interpretação dos cortes histológicos

2

Corte

micrótomo

3

Coloração:
•Estrutura de natureza básica
corante ácido = estrutura acidófila.



• Estrutura de natureza ácida
corante básico = estrutura basófila.



Variedades de microscópio de luz:
Contraste de fase(visualização de tecidos vivos).

Variedades de microscópio de luz:
Polarização (luz polarizada = moléculas longas).

Variedades de microscópio de luz:
Fluorescência (radiação ultra-violeta).4

Variedades de microscópio de luz:
Confocal (raio laser gera imagens).

microfilamentos de actina + núcleo

microfilamentos

microtúbulos

Epitélio ciliado da traquéia

célulasvegetais em diversas fases da mitose

5

células do sangue

artéria muscular

pele humana

MICROSCOPIA
ELETRÔNICA
DE
DE
TRANSMISSÃO

6

Etapas:
Coleta
Fixação
Desidratação...
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