dosagem de glicose

METODOLOGIA Os materiais utilizados para a realização do experimento foram: tubos de ensaio, estante para tubos, pipetas automáticas e ponteiras plásticas, banho-maria, cronômetro, espectrofotômetro. Necessitou-se também de trajes e acessórios adequados como jaleco e luvas. Para dar início a atividade, foi adicionado em três tubos distintos com o auxílio da pipeta automática 2 mL da enzima glicose oxidase. Logo após, maçaram-se os três tubos como B, P e S. No tubo P além da enzima, apresentava 20 L de amostra de glicose padrão 100 mg/dL e o tubo S plasma sanguíneo de um voluntário sem estar em jejum. O esquema abaixo mostra como essas soluções devem ser preparadas:

Dessa forma, a dosagem de glicose foi realizada pelo método enzimático onde a glicose oxidase (GOD) catalisou a oxidação da glicose de acordo com a seguinte reação:

O peróxido de hidrogênio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol, sob ação catalisadora da peroxidase, através de uma reação oxidativa de acoplamento formando antipirilquinonimina de cor vermelha, cuja intensidade é proporcional à concentração da glicose na amostra (plasma ou soro). Para dar continuidade a atividade, Misturaram-se as amostras e colocaram-nas em banho-maria 37ºC por 10 min. Dessa forma, as amostras ficam nas mesmas temperaturas. Lembrando que, quanto maior a temperatura, mais rápido as enzimas atuam. Para finalizar, as amostras foram levadas para o espectrofatômetro para determinar a absorbância do teste e do padrão em 505 nm. Esse equipamento emite luz que atravessa a amostra e do outro lado do equipamento tem um receptor que recebe o que sobra da luz. Para a análise, zerou o espectrofatômetro colocando o tubo que continha apenas a enzima. Logo após, os outros tubos foram analisados.