Cromatografia em papel

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  • Publicado : 29 de novembro de 2012
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CROMATOGRAFIA EM PAPEL
 
    Esta técnica é assim chamada porque utiliza para a separação e identificação das substâncias ou componentes da mistura a migração diferencial sobre a superfície de umpapel de filtro de qualidade especial (fase estacionária). A fase móvel pode ser um solvente puro ou uma mistura de solventes.
    Este método é muito útil para separar substâncias muito polares, comoaçúcares e aminoácidos. Possui o inconveniente de poder-se cromatografar poucas quantidades de substância de cada vez.
    Manipula-se o papel com cuidado e pelas pontas, e cortam-se tiras emtamanhos que possam ser contidos nas cubas.É importante cortar o papel seguindo o eixo das fibras, pois a celulose está orientada neste sentido, o que facilitará a passagem da fase móvel.
 
 
Importante:•   A tira de papel não deve tocar as paredes da cuba.
•  Ao adicionar o papel na cuba, cuidar para que a amostra não entre em contato direto com o eluente, deixando que ascenda ou descenda pelasuperfície do papel, apenas por capilaridade.
•  Utilizam-se tubos capilares para a colocação das amostras em pontos que as manchas não devem exceder a 2mm de largura. Para que seja possível o controleda quantidade de amostra adicionada, costuma-se afinar os tubos capilares comerciais, aquecendo e estirando o vidro em uma chama.
•      A amostra é aplicada na borda inferior, acima da altura doeluente (cromatografia ascendente) ou na borda superior (cromatografia descendente).
•      Caso a substância se encontre em concentração baixa, repetir a aplicação em intervalos de tempo suficientespara secar a aplicação anterior.
•      Os pontos de aplicação de amostra devem ter 2cm de distância entre si.
•   Não demorar na colocação do papel dentro da cuba, para não haver perda de saturação.•   Com o auxílio de uma pinça, colocar com cuidado o papel na cuba, evitando que ocorra ascensão irregular do líquido. Aguardar que o eluente chegue próximo à extremidade superior.
•     Esperar...
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