Concentrção de proteina
BACHARELADO EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
BRUNA LUISA DAL GOBBO
LARISSA GLUGOSKI MÁRCIA KARINE FRANQUITTO VANESSA DA COSTA VISCENTE
DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DE PROTEÍNA
PONTA GROSSA
MARÇO - 2011 1. INTRODUÇÃO
As proteínas desempenham papéis muito importantesna maioria dos processos biológicos atuam como enzimas,hormônios, neurotransmissores, transportadores atravésdas membranas celulares e outros.
A albumina é uma proteína de alto valor biológico.É encontrada no plasma do sangue e sintetizada no fígado, também pode ser encontrada no ovo, no leite, na carne, etc. Suas principais funções são: manutenção da pressão osmótica, transporte de hormônios produzidos pela tireóide, transporte de ácidos graxos livres, de hormônios lipossolúveis, de bilirrubina não conjugada e controle de ph.
Os métodos para a determinação da concentração de proteínas são muito variados, os mais utilizados são os espectrofotométricos.Os métodos geralmente mais utilizadossão o do biureto, de Lowry1, do “Coomassiebrilliant blue” BG-250 ou reagente de Bradford, do BCA ou reagente de Smith, e de absorção de proteínas no ultravioleta (ZAIA, 1997).
A reação do Biureto é devida às ligações peptídicas, dando positiva para proteínas e peptídeos com 3 ou mais resíduos de aminoácidos. A reação é também positiva para as substancias que contem 2 grupos carbomínicos (-CO-NH2 ) ligados diretamente ou através de um único átomo de carbono ou nitrogênio. Este é o caso do biureto que apresenta reação positiva de onde provém o nome da mesma.
As proteínas ou peptideos, quando tratados por uma solução de sulfato de cobre, em meio alcalino, dão uma coloração violeta característico. O responsável pela cor é um complexo, que pode ser representado como:
Espectrofotômetro é um instrumento usado para medir a quantidade de luz de um dado comprimento de onda, que é transmita por uma amostra. Os espectrofotômetros são construídos de tal maneira que podem