ação enzimática

1.Introdução

Enzimas são proteínas de grandes dimensões especeializadas na catálize de reações biológicas, ou seja, aceleram a catalise da reação.
Apesar de participarem nas reações, elas não alteram o equilíbrio das reações, e encontram-se inalteradas no final da reação.
Enzimas não reconhecem todas as moléculas, pelo contrário, elas reconhecem especificamente os substratos entre todas as moléculas.
Especificidade controlada por encaixe único entre a enzima e o substrato.
Diversos fatores podem influenciar a velocidade de uma reação enzimática, como ph, temperatura, concentração da enzima e do substrato.

2.Materiais e Métodos 2.1 materiais

. Enzima invertase ( 0,1 mg proteina/ml).
.Tampão acetato 0,05 M Ph 4,7.
.Sacarose 0,2 M.
.Reativo: ADNS (ácido 3,5 dinitrossalicílico)
. Pipetas graduadas de 1 a 10 ml
. 6 tubos de ensaio
. Banho Maria a 100º C
. Espectrofotômetro

2.2 métodos

No procedimento adicionamos nos tubos 1, 2, 3, 4, 5, e 6, respectivamente os compostos:

Tampão acetato: 1,0 ml em todos os tubos.
Água destilada: 1,0 ml no tubo1, 0,9 ml no tubo2, 0,8 ml no tubo 3, 0,6ml no tubo4, 0,2 ml no tubo 5 e 0 ml no tubo 6

Sacarose 0,2 M (ml): 0,5 ml em todos os tubos.

Invertase 0,1 mg/ ml (ml): 0 ml no tubo 1, 0,1 ml no tubo 2, 0,2 ml no tubo3, 0,4 ml no tubo 4 0,8ml no tubo 5, e 1,0 ml no tubo 6.

. Esperamos por 5 minutos e adicionamos 1,0 ml de ADNS em cada tubo. Aquecemos os tubos em banho maria a 100º C por 5 minutos depois resfriamos durantes 5 minutos em gelo esperamos 5 minutos e adicionamos água destilada na mesma proporção em todos os tubos: 6,5 ml.e homogeinizamos, então lemos a absorbâncias a 540nm. Adicionamos aproximadamente 1,0 ml do liquido de cada tudo no espectrofotômetro.

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