Análise e purificação de proteínas

UNIP – UNIVERSIDADE PAULISTA
CRUSO – BIOMEDICINA

Métodos e Técnicas de Análise e Purificação de Proteínas

Disciplina: Bioquímica Metabólica
Professora: Fábio
Alunos:
Bruno Vinicius de Aguiar RA: 912077-7
Vinicius Canale RA: 958536-2
Dulcineia Monteiro Holinger RA: 773695-9

Jundiaí - 2009
ESPECTOFORTOMETRIA

A palavra espectrofotometria designa um método de análise baseado em medidas de absorção de radiação eletromagnética. Esse método baseia-se na absorção e/ou emissão de radiação eletromagnética por moléculas. A Espectrofotometria está compreendida na absorção da radiação nos comprimentos de onda entre Ultravioleta e Infravermelho no espectro da radiação eletromagnética.
O espectrofotômetro é um aparelho que faz passar, por uma solução, um feixe de luz monocromática é mede a quantidade de luz que foi absorvida por essa solução. Usando um prisma o aparelho separa a luz em feixes com diferentes comprimentos de onda (tal como acorre no arco-íris). Assim, permite-nos saber que quantidade de luz é absorvida a cada comprimento de onda.

Absorção de Radiação:

Várias coisas podem acontecer com a radiação luminosa que atinge certa substância. A radiação incidente pode sofrer reflexão, refração, espalhamento ou ser absorvida pelo material. Disso resulta que somente uma parte da radiação incidente é transmitida através do material.
O processo de absorção ocorre ao nível molecular. Assim, como ocorre um átomo, cada molécula caracteriza-se por possuir níveis de energia moleculares quantizados, os quais podem se ocupados pelos elétrons das moléculas. Por outro lado, a radiação carrega energia, sendo que o valor dessa energia depende do comprimento de onda da radiação. A absorção da radiação se dá quando a energia que ela transporta é igual à diferença entre dois níveis de energia da molécula; nessa situação, a energia da radiação é transferida para a molécula e ocorre a chamada absorção