Reação de polimerase em cadeia - pcr

Termociclador REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE (PCR) Técnica que permite a amplificação da quantidade de DNA específico utilizando a enzima Taq DNA polimerase, sequências iniciadoras específicas (primers) e variações de temperatura controladas. ETAPAS DO PCR 1. Adição de reagentes DNA ETAPAS DO PCR 1. Adição de reagentes DNA dATP dCTP dGTP dTTP (nucleotideos) ETAPAS DO PCR 1. Adição de reagentes DNA Taq polimerase Primers Tampão Água dATP dCTP dGTP dTTP (nucleotideos) Taq DNA polimerase O nome Taq vem de Thermus aquaticus, a qual é uma bactéria encontrada sobrevivendo a altas temperaturas em geisers no Yellow Stone National Park. Taq DNA polimerase Termoestabilidade limitada Temperatura 92,5oC 95,0oC 97,5oC T 1/2 (minuto) 130 40 5 Taq DNA polimerase  Trata-se de uma enzima cuja atividade é mantida durante 45 minutos a 95°C. • Sua quantificação é dada em Unidades (U), sendo que cada U é definida como a quantidade de enzima capaz de incorporar 10 nM de dNTP em cerca de 30 min a 72°C. • Na maioria dos protocolos são utilizadas 2,0 a 2,5 U (0,5 l) de enzima em volume final de 100 l. • É importante deixar claro que o excesso de enzima também pode prejudicar a eficiência da reação, podendo inclusive inibi-la. Seqüências dos primers • Os primers (forward e reverse) devem ser construídos de acordo com a conveniência do investigador, de modo que esses possuam seqüências complementares a determinadas regiões…

REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE PCR PCR – Reação em Cadeia da Polimerase Objetivo: • Aumentar o número de cópias do DNA a ser estudado http://www.sumanasinc.com/webcontent/anisamples/molecularbiology/pcr.html PCR – Reação em Cadeia da Polimerase Aplicações: • Na identificação e tratamento de doenças condicionadas geneticamente; • No diagnóstico muito sensível e específico de doenças infecciosas e parasitárias; • No diagnóstico do câncer; • Na manipulação terapêutica…

PCR em tempo real Pesquisa Uma Inovação tecnológica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) Caroline Monteiro Novais Estudante do curso de farmácia do Centro Universitário de Barra Mansa. E-mail: carol_farmacia@hotmail.com Melissa Pires-Alves Doutora em Biologia Celular e Molecular pela Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Professora do Centro Universitário de Barra Mansa. E-mail: melalves@ig.com.br Colaborador Fábio Freitas Silva Introdução advento da…

Reação em cadeia da polimerase (PCR) A reação em cadeia da polimerase (PCR, Polymerase Chain Reaction) foi inicialmente desenvolvida por Saiki e colaboradores em 1985. Em seguida, foi aprimorada por Kary Mullis, que tentou publicar seus experimentos nas duas revistas científicas mais importantes do mundo, a Science e a Nature, as quais não reconheceram a importância de tal conquista. Kary Mullis acabou publicando seu trabalho sobre a amplificação do gene da β-globina humana em uma…

SENAI – CIC ISABELLA DA SILVA BROCARDO PATRICIA CAROLINE DE ARAUJO RELATÓRIO CURITIBA 2013 01) - Em um micro tubo de ensaio, coloca-se uma solução tampão, os nucleotídeos, um cofator, dois primers (um negativo e um positivo), o DNA a ser analisado, água ultrapura e por último a DNA Polimerase, devido ao fato de ter que ser mantida em resfriamento. - Coloca-se então o micro tubo em uma máquina de PCR, que realizara os ciclos de…

mailtonin_ron@hotmail.com nin_ron@hotmail.com Considerada uma tcnica de biologia molecular revolucionria, a reao em cadeia da polimerase (PCR Polymerase Chain Reaction) permitiu o rpido desenvolvimento do estudo de sequncias de cidos nuclicos. Desenvolvida por Kary Banks Mullis, em abril de 1983, essa tcnica de biologia molecular consiste em nada mais que a sntese enzimtica de cpias de cidos nuclicos em laboratrio. O cientista recebeu o prmio Nobel de qumica de 1993 por sua descoberta.…

FRANCISCO MARCOS BEZERRA DA CUNHA REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE (PCR) Valor diagnóstico na hanseníase neural pura Tese apresentada como requisito para obtenção do grau de Doutor. Curso de Pós-Graduação em Medicina Interna do Setor de Ciências da Saúde da Universidade Federal do Paraná Orientador: Prof. Dr. Lineu César Werneck CURITIBA 2003 EPÍGRAFE “A busca do conhecimento é uma luta incessante entre o não saber e o querer saber. Dialéctica presente no coração…

BIOMEDICINA REAÇÃO EM CADEIA DE POLIMERASE (PCR) DENISE NOVAES DA SILVA BELEM – PA / 2015 ESAMAZ - ESCOLA SUPERIOR DA AMAZÔNIA CURSO DE BIOMEDICINA DENISE NOVAES DA SILVA REAÇÃO EM CADEIA DE POLIMERASE (PCR) Trabalho apresentado à disciplina de Biologia molecular do curso de Biomedicina da Escola Superior da Amazônia, para obtenção de nota. Orientadora: Paloma BELEM – PA/ 2015 INTRODUCÃO A Reação em Cadeia da…

REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE - PCR ANDRÉIA CHAVES EVELYN BELTRÃO OLIVEIRA MONTEIRO LETICIA MENEZES DE ALMEIDA RACHEL RIBEIRO DOS SANTOS BELÉM – PARÁ 2015 1.INTRODUÇÃO A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma técnica de Biologia Molecular que permite a replicação in vitro do DNA, de forma extremamente rápida. Com a PCR, sequências mínimas do material genético podem ser amplificadas milhões de vezes em poucas horas, permitindo a detecção…

INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO CIENCIA E TECNOLOGIA DO PARÁ – CAMPUS CASTANHAL CURSO: BACHARELADO EM AGRONOMIA FRANCIMARA ROCHA DOS SANTOS ISADORA PIRES CAVALCANTE PAULA REANNY FERREIRA DOS SANTOS REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE- PCR CASTANHAL 2013 INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO CIENCIA E TECNOLOGIA DO PARÁ – CAMPUS CASTANHAL CURSO: BACHARELADO EM AGRONOMIA FRANCIMARA ROCHA DOS SANTOS ISADORA PIRES CAVALCANTE PAULA REANNY FERREIRA DOS SANTOS …