Veronica

Explicar o método de TBARS

O TBARS é um teste das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, ou seja, baseia-se na reação do ácido tiobarbitúrico com os produtos de decomposição dos hidroperóxidos e, portanto, é utilizado para estudos de peroxidação lipídica. Um dos principais produtos formados no processo oxidativo é o malondialdeído (MDA), um aldeído com 3 átomos de carbono.
O MDA é um composto carcinogénico e mutagénico produzido endogenamente durante a peroxidação dos ácidos gordos polinsaturados. Este ao reagir com o ácido tiobarbitúrico origina uma cor avermelhada que absorve a 525nm.
Os resultados são normalmente expressos em unidades de absorvência por unidade de peso da amostra ou em “valor TBA”, definido como o peso, em mg, de MDA por kg de amostra. A sensibilidade do doseamento das substâncias reativas do ácido tiobarbitúrico, fez com que o TBARS se tornasse no ensaio do método de escolha para o rastreio e monotorização da peroxidação lipídica, ou seja, um indicador do stress oxidativo. Sendo que na determinação da peroxidação lipídica, este é atualmente o ensaio mais utilizado.
O TBARS fornece ainda informações importantes sobre os radicais livres em determinados estados de doença e atualmente tem sido utilizados para quantificar a atividade antioxidante dos mais variados compostos.
O teste tem sofrido modificações para aumentar a sensibilidade de deteção e eliminar interferências de outros constituintes da amostra. Paralelamente ao método espetrofotométrico para quantificação do complexo MDA-TBA, recorre-se com frequência à cromatografia líquida de alta resolução e à cromatografia gasosa. O ensaio pode ser executado segundo dois procedimentos:
1. Diretamente sobre o produto, seguido da extração e doseamento do complexo corado;
2. Extração prévia dos aldeídos, seguida de reação com o TBA.
No primeiro caso, poder-se-á separar o complexo MDA-TBA formado, por cromatografia líquida de alta resolução, usando uma pré-coluna. Desta forma