técnicas imunoenzimáticas

TÉCNICAS IMUNOENZIMÁTICAS
As técnicas imunoenzimáticas são baseadas na utilização de antígenos ou anticorposmarcados com enzimas e permitem a detecção, titulação e quantificação de substanciasde interesse biológico.
Imunoperoxidase
As técnicas para localização de constituintes celulares seguem o mesmo princípio da imunofluorescência, com a diferença de que, em vez do fluorocromo,emprega-se a enzima, que tem maior capacidade de amplificação. A enzima converte ocomponente cromógeno (substrato+doador de hidrogênios) em produto insolúvel que precipita no sítio da reação. Esses precipitados podem ser visíveis ao microscópioeletrônico.
Enzimaimunoensaio
O enzimaimunoensaio é um método quantitativo em que a reação antígeno-anticorpo é monitorada por medida da atividade enzimática. Desempenha um papelmuito importante no laboratório clínico, pois, além da elevada sensibilidade comparávelà do radioimunoensaio, apresenta vantagens de utilizar reagentes estáveis, estar livre dasexigências de trabalhar com radioisótopos e poder ser adaptado tanto a testes simplescomo à automação sofisticada.Uma característica comum entre radioimunoensaio e enzimaimunoensaio é que ambosmedem, diretamente, a interação entre o antígeno e o anticorpo, não dependendo de umsegundo fenômeno como precipitação, aglutinação ou fixação de complemento.O enzimaimunoensaio foi classificado em dois tipos: homogêneo e heterogêneo. Nosensaios homogêneos não é necessária a separação entre os complexos antígeno-anticorpo e o antígeno e/ou o anticorpo livres, pois a interação antígeno-anticorpomodula a atividade da enzima. Nos ensaios heterogêneos, a separação é necessária, poisa atividade da enzima não é alterada pela reação antígeno-anticorpo. Os ensaioshomogêneos são mais utilizados para a detecção de haptenos e os heterogêneos para adetecção de moléculas maiores.
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
Esse teste foi desenvolvido como uma alternativa ao radioimunoensaio para adetecção de