clonagem molecular

Clonagem molecular

Tópicos
Significado e objectivos da clonagem molecular
Etapas da clonagem molecular
Sistemas de clonagem em E. coli de fragmentos de diferentes dimensões
Sistemas de clonagem em E. coli de produção de DNA de cadeia simples
Preparação de bibliotecas genómicas
Preparação de bibliotecas de cDNA

Desenvolvimento da clonagem molecular

An Introduction to Genetic Engineering

Definição de clonagem molecular
A clonagem molecular é o processo de construção de moléculas de DNA recombinante e da sua propagação em hospedeiros apropriados que possibilitam a selecção do DNA recombinante.
Esta tecnologia permite estudar os genes e os seus produtos, obter organismos transgénicos e realizar terapia génica.
Expressões utilizadas com o mesmo significado: clonagem molecular engenharia genética manipulação génica clonagem génica tecnologia do DNA recombinante modificação genética nova genética

Representação esquemática da clonagem molecular

Genetics a molecular approach

Objectivos gerais da clonagem molecular (1)

Recombinant DNA. Principles and Methodologies

Objectivos gerais da clonagem molecular (2)

A clonagem molecular permite isolar e amplificar uma sequência particular de DNA a partir de uma mistura complexa de fragmentos, porque se formam moléculas de DNA recombinante independentes que replicam numerosas vezes no hospedeiro.

Papel dos ácidos nucleicos na clonagem molecular
Os ácidos nucleicos são as moléculas centrais da clonagem molecular: • O DNA é utilizado como vector de clonagem ou como inserto
• O cDNA, obtido a partir de mRNA, é utilizado como inserto
• DNA e RNA obtidos por clonagem molecular são utilizados como sondas de hibridação na identificação, quantificação e caracterização de outros ácidos nucleicos

Principais etapas da clonagem molecular (1)

Construção de DNA recombinante

Transformação

Principais etapas da clonagem molecular (2)

Amplificação

Isolamento de