biotecnologia

é rRNA e tRNA). Cuidados específicos na preparação de DNA e RNA Nucleases: DNAses e RNAses - Sempre presentes em qualquer material biológico, tanto no organismo-alvo de estudo como no manipulador; - São contaminantes comuns em qualquer material de vidro e Métodos de Separação Baseiam-se nas diferenças existentes entre os componentes que se desejam separar. - Carga elétrica e tamanho geralmente constituem a base dos processos de separação. Entre as técnicas pode-se citar principalmente: - Eletroforese em gel; de plástico não tratado adequandamente para sua remoção; - Presentes em reagentes químicos. 3 26/08/2014 Eletroforese em gel Eletroforese em gel Migração tamanho. Baseada no movimento de partículas carregadas em um campo elétrico, em direção a um eletrodo de carga contrária. inversamente proporcional ao Ácidos nucléicos têm carga global negativa (PO4-). Utiliza-se um suporte, por onde a molécula é carregada em um campo elétrico. Influência da topologia: - Suporte: géis poliméricos (agarose e poliacrilamida). • Formam uma matriz entrecruzada contínua; • Agarose: separa fragmentos maiores (milhares de oligonucleotídeos); • Poliacrilamida: separa fragmentos menores (centenas de oligos). - linear vs. circular; - fita dupla vs. fita simples. Os oligonucleotídeos menores se deslocam mais que os maiores. Eletroforese em gel de agarose Gel submerso; Preparação da amostra inclui componente de…

através do gel de agarose: a) tamanho da molécula de DNA b) concentração da agarose c) conformação do DNA (formas circulares ou não lineares: I; II e II I) d) a presença de brometo de etidium no gel e) voltagem aplicada f) tipo de agarose g) tipo do tampão de eletroforese O DNA permanece intacto durante o processo de eletroforese, podendo ser eluido do gel e utilizado em outros procedimentos como clonagem, preparação de sondas,construção de bibliotecas, etc. Discussão: O…

meio onde ocorre a corrida e precisa formar uma malha com poros dentre onde as partículas correrão. O material do qual é feito o gel, assim como suas concentrações, dependem do tamanho das partículas que se está separando e pode ser de agarose ou poliacrilamida. A agarose é um polissacarídeo extraído de diversos gêneros de algas marinhas, insolúvel em água fria, porém, expande-se consideravelmente e absorve uma quantidade de água de cerca de até vinte vezes o seu próprio peso, se…

de tamanhos distintos se encontram em diferentes pontos da matriz. O tipo de matriz que é usada (agarose ou poliacrilamida) depende do tamanho dos fragmentos de DNA que se pretende separar e visualizar. Devido à diferença no tamanho dos poros dessas matrizes, utiliza-se normalmente o gel de agarose para a separação de fragmentos que variam de 0,2 kb a 50 kb (1 kb = 1000 pares de bases) e o gel de poliacrilamida para separação de fragmentos pequenos, de até 1kb. Alternativamente para a…

tamanhos distintos se encontram em diferentes pontos da matriz. O tipo de matriz que é usada (agarose ou poliacrilamida) depende do tamanho dos fragmentos de DNA que se pretende separar e visualizar. Devido à diferença no tamanho dos poros dessas matrizes, utiliza-se normalmente o gel de agarose para a separação de fragmentos que variam de 0,2 kb a 50 kb (1 kb = 1000 pares de bases) e o gel de poliacrilamida para separação de fragmentos pequenos, de até 1kb. Alternativamente para…

Procedimentos - PREPARAÇÃO DO CONTEINER DO FANTOMA Tempo para preparo: aproximadamente 1 dia - Passo 1: Coloque um “tapete” no fundo do contêiner (figura 2) - passo 2: despeje água quente no tapete (suficiente para cobri-lo), cubra o contêiner por 24 horas. *importante: as bolhas de ar causam reflexos nas imagens de ultrassom e também prejudicam o fantoma de parênquima, então removas todas as bolhas. - PREPARAÇÃO DO TECIDO TUMORAL Tempo de preparo: apro. 2 horas…

meios-suporte, tais como papel de filtro, sílica gel, membranas de acetato de celulose, gel de agarose, amido ou poliacrilamida, entre outros. O suporte deve ser química e fisicamente inerte, de modo a não interferir na mobilidade das moléculas. No caso de eletroforese em géis, como poliacrilamida e agarose, a migração das moléculas é profundamente influenciada pelas malhas porosas. Em relação a géis de poliacrilamida ou agarose, a porosidade do gel determina o poder de resolução das…

FACULDADE CATÓLICA SALESIANA FARMÁCIA – FA4N CRISTINA GOMES DAYANE BARBOSA ELETROFORESE EM GEL DE AGAROSE Disciplina: Biologia Molecular Professora: Melissa de Freitas Cordeiro Silva VITÓRIA OUTUBRO– 2014 CRISTINA GOMES DAYANE BARBOSA ELETROFORESE EM GEL DE AGAROSE Relatório do Curso de Graduação em Farmácia apresentado a Faculdade Católica Salesiana - FCS, como partedas exigências da Disciplina de Biologia Molecular soborientação da ProfessoraMelissa de Freitas Cordeiro…

tais como o teste de paternidade ou a identificação de suspeitos por amostras de DNA. Para que esse tipo de exames seja realizado, primeiramente é preciso extrair o DNA através do método “salting out” e posteriormente submeter esse DNA a uma eletroforese a qual detalhará o tamanho de suas bases possibilitando sua análise. A Eletroforese é um método que depende da capacidade de moléculas carregadas migrarem quando submetidas a um campo elétrico, a separação eletroforética é geralmente…

CORREIA Tipagem Genética de Microrganismos © Lab. de Diversidade Microbiana Centro de Biologia Celular Dep. de Biologia, U. de Aveiro 3810-193 Aveiro Tel: 234.370778 • Fax 234.426408 http://sweet.ua.pt/~f426 i Índice Introdução 1 Protocolos experimentais 9 RFLP's - Ribotipagem 2 Extracção de DNA total bacteriano 9 Digestão de DNA com endonucleases de Rep - PCR Sequências nucleotídicas 6 10 12 Marcação por PCR da sonda de DNA 16S …