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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARINGÁ
DEPARTAMENTO DE FÍSICA

PRÁTICA DE ESPECTROFOTOMETRIA

Nome: Camilla Borges Gazolla-67565
Tamires Tolomeotti Pereira-67262

Ciências Biológicas
Física- Turma 31

Maringá/2012

1. Introdução

Espectrofotômetro (Fig. 01) é um aparelho utilizado em laboratórios para medir e comparar a quantidade de luz (energia radiante) absorvida por uma determinada solução. O grande inventor deste instrumento foi Arnold Beckman (Fig. 02), em 1940, o mesmo inventor do pHmetro, em 1934. Nos dias de hoje, o espectrofotômetro é usado na área de química, física, bioquímica e biologia molecular. Figura 01- Espectrofotômetro.

Figura 02- Arnold O. Beckman
Os principais componentes de um espectrofotômetro são (fig. 03):
• Fonte de luz (lâmpada);
• Colimadores (espelho);
• Monocromador (prisma ou grade de difração);
• Seletor de (fenda);
• Porta cubetas;
• Detector fotoelétrico;
• Medidor elétrico.

Figura 03- Partes de um espectrofotômetro

Quando utilizado o espectrofotômetro para medir a absorbância de alguma substância, ao atingir a solução, a luz incidente pode sofrer reflexão, refração, espalhamento ou ser absorvida pelo material. Disso resulta que somente uma parte da radiação incidente é transmitida através do material. (Fig. 04).

Figura 04- Reflexão, refração, espalhamento e absorção fazem com que a luz que sai da amostra tenha uma intensidade menor do que a luz que incide.

Como moléculas de substâncias diferentes não possuem níveis moleculares de energia iguais ocorre que cada substância absorve a radiação de maneira peculiar, ou seja, os comprimentos de onda, onde uma certa substância absorverá, são característicos de sua estrutura. Se levantarmos dados referentes á intensidade de luz absorvida por uma substância, em função dos comprimentos de onda da radiação, estaremos obtendo uma curva chamada espectro de absorção da substância. Assim, cada substância