Sacarose

RELATÓRIO AULA PRÁTICA
CINÉTICA ENZIMÁTICA

PROFº. DRº IDÉLCIO NOGUEIRA DA SILVA

FÁBIO HENRIQUE PARISI
JEAN PATRICK DA SILVA
LUCAS MARCELINO HILÁRIO
MARCOS MALAGOLI JUNIOR
MAYARA CARDOSO ALVES
NATÁLIA DE OLIVEIRA PEREIRA

ASSIS 2014
INTRODUÇÃO
A Cinética Enzimática é uma ferramenta da enzimologia que estuda os mecanismos e a velocidade de reações químicas catalisadas por enzimas. Estes compostos são responsáveis pela ocorrência e controle da maioria dos processos metabólicos numa célula. Possuem como principais características:
Grande especificidade pelo(s) substrato(s);
Grande eficiência na catálise e
Efeito saturante do próprio substrato. Há na estrutura da enzima uma determinada região diretamente responsável pela ação catalítica. Essa região é denominada sítio ativo e sua conformação correta é fundamental para a atividade enzimática. Ali se localizam diversos resíduos (aminoácidos) que podem desempenhar funções de orientação do substrato e direta interação com este, permitindo que a reação ocorra.
A enzima a ser estudada é a invertase, que catalisa a hidrólise da sacarose (um açúcar não redutor) em glicose e frutose (redutores).

Os açúcares redutores formados reagem com o ácido 3,5-dinitro salicílico permitindo o monitoramento da reação.
A invertase deste experimento foi extraída do fermento fresco de pão Fleischmann’s®.

OBJETIVO
Estudar a influência da concentração de substrato nas velocidades de uma reação enzimática, examinar as curvas obtida, calcular alguns parâmetros cinéticos (Km e Vmáx) e comparar com os da literatura.
EQUIPAMENTOS E VIDRARIAS
Espectrofotômetro;
Estante com 8 tubos de ensaio;
2 pipetas graduadas de 2mL;
1 pipeta graduada de 1mL;
1 pipeta volumétrica de 1 mL;
Centrífuga e banho Maria para dosagem de açúcares redutores.
PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
A. Efeito da Concentração de Substrato
Foram numerados sete tubos de ensaio de mesmo tamanho. Foi adicionado