Relatório de Cinética de reações enzimaticas

Universidade Federal de Alfenas-MG

Relatório de Cinética de Reações Enzimáticas

04/10/2012

Objetivo
Estudo das reações catalisadas por enzimas, observando no espectrofotômetro as concentrações diferentes de produto formado.
Manipulação dos Dados
1. Calcule as concentrações de catecol usadas na experiência, ou seja, a concentração final dentro da cubeta. Use estas concentrações nos cálculos.
Concentração da cinética 1:
0,5ml*0,005mol/L=3,0ml*M
M= 0,000833mol/L
Concentração da cinética 2:
0,75ml*0,005mol/L=3,0ml*M
M= 0,00125mol/L
Concentração da cinética 3:
1,0ml*0,005mol/L=3,0ml*M
M= 0,001667mol/L
Concentração da cinética 4:
1.5ml*0,005mol/L=3,0ml*M
M= 0,0025mol/L

2. Calcule a velocidade inicial (V0, coeficiente angular) para todas as cinéticas realizadas fazendo um gráfico de absorbância versus tempo.
Calculo da Vo  Vo= ΔA/Δt;
Vo da cinética 1: 0,50ml de catecol 0,005M + 2,50ml de água

Gráfico dos dados

Gráfico com linha de tendência

Vo= ΔA/Δt
Vo=0,389-0,150/200
Vo= 0,0007967

Vo da cinética 2: 0,75ml de catecol 0,005M + 2,25ml de água;

Gráfico dos dados

Gráfico com linha de tendência

Vo= ΔA/Δt
Vo= 0,487-0,170/200
Vo= 0,001585

Vo da cinética 3: 1,00ml de catecol 0,005M + 2,00ml de água
Gráfico dos dados

Gráfico com linha de tendência

Vo= ΔA/Δt
Vo= 0,540-0,177/200
Vo= 0,001815

Vo da cinética 4: 1,50ml de catecol 0,005M + 1,50ml de água
Gráfico dos dados

Gráfico com linha de tendência

Vo= ΔA/Δt
Vo = 0,511- 0,195/200
Vo=0,00158
3. Calcule Km e Vmax para a enzima, como mostrado na fig 2.
Formula: 1/V= Km/Vmax*1/[S]+1/Vmax
Cinética 4:
Y=0,0007x + 0,3192  R2 = 0,9082
1/Vmax = 0,3192
Vmax = 3,1328
Km/Vmax = 0,0007
Km = 0,0007*0,31328
Km= 0,002193
4. Faça um gráfico com os valores obtidos no item 7, absorbância versus comprimento de onda. (baseado no espectro, justifique porque as cinéticas foram acompanhadas em 420nm).