Cinetica

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA
COLEGIADO DE CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS

DEISE ALESSANDRA
JANILDA MOREIRA
LARISSA RAMALHO
THÁLITA CAIRES.

RELATÓRIO DE BIOQUÍMICA
CINÉTICA ENZIMÁTICA

FEIRA DE SANTANA
2010
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA
COLEGIADO DE CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS

DEISE ALESSANDRA
JANILDA MOREIRALARISSA RAMALHO
THÁLITA CAIRES.

Relatório solicitado com objetivo de relatar os procedimentos e resultados da aula prática sobre cinética enzimática. Solicitado pelo professor Bruno, como avaliação processual da I Unidade da disciplina de Bioquímica durante o semestre 2010.1

FEIRA DE SANTANA
2010
Cinética Enzimática

1. Objetivo
Comparar a atividadeenzimática em relação à temperatura, pH e concentração

2. Fundamentação Teórica
Enzimas são proteínas que catalisam uma reação química específica e em sua maioria são conjugadas, estando associadas a grupos não-protéicos. Sua atividade catalítica depende da conservação da sua estrutura original e qualquer variação nessa estrutura altera significativamente sua atividade.
Umacaracterística comum de todas as enzimas é a presença e uma fenda em sua estrutura, formada principalmente por resíduos de aminoácidos hidrofóbicos dentro dos quais se fixam o substrato. Certos resíduos de aminoácidos que são responsáveis pela interação estérica com o substrato e, portanto, pela especificidade do sistema, estão localizados nesta fenda, bem como os aminoácidos envolvidos no aspectocatalítico da reação. Na maioria dos casos estes resíduos são do tipo iônico e mais reativo. Além disso, a união dos íons precedentes da solução podem também cooperar na presença do substrato na catálise da reação.
Nesta prática será verificada a cinética enzimática da amilase salivar – uma enzima capaz de hidrolisar o amido em unidades de maltose e acrodextrinas, onde a determinação davelocidade da reação está relacionada com fatores cinéticos como: temperatura, pH e concentração de substrato e da enzima, presença de cofatores e inibidores, etc.

3. Procedimentos, Resultados e Discussão
A prática foi realizada em 3 etapas nas quais foram analisados os efeitos da temperatura, pH e concentração de substrato na cinética enzimática

3.1 Efeito da TemperaturaPreparou-se uma solução de saliva 10% e desta foram adicionados 3mL em 3 tubos diferentes com identificação devida. Em outros 3 tubos também identificados preparou-se a solução de substrato contendo: 5 mL de solução de amido 2%, 1mL de NaCl 0,1M e 3,5 mL de solução tampão pH 6,5. Cada um dos tubos contendo as soluções de saliva e de substrato foram colocados em temperaturas diferentes durante 5minutos, conforme o quadro abaixo:

Quadro 1: Tubos em temperaturas variadas
|Temperaturas |0ºC |38ºC |100ºC |
|Solução | | | |
|Saliva |Tubo 1a|Tubo 2a |Tubo 3a |
|Substrato |Tubo 1b |Tubo 2b |Tubo 3b |

Após o tempo necessário, retirou-se 0,5 mL da solução de saliva que foram adicionados aos tubos com substrato nas temperatura correspondentes e esperou-se 2 minutos. Emseguida, dos tubos contendo a nova solução (substrato+saliva), retirou-se 2 gotas de cada tubo que foram adicionadas à outros tubos previamente preparados contendo 1mL de corante lugol. Assim, 2 gotas do tubo 1 à 0ºC foram colocadas no tubo 1 contendo lugol e desta mesma forma procedeu-se com os tubos 2 e 3 da solução de saliva+substrato. Esse instante foi considerado o tempo zero e, feito o...
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