RELATORIO CMC

CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS PROTEINAS E ENZIMAS
OBJETIVOS:

Demonstrar a presença de aminoácidos livres através da reação de Nihidrina; Caracterizar a presença de proteínas em material biológico através da reação de Biureto ; Demonstrar a especificidade Enzima-Substrato.

1) REAÇÃO NIHIDRINA:
Foi utilizado 2 tubos de ensaio nesta reação: No tubo 1 foi colocado 1 ml do reagente TRIPTOFANO, 5 gotas de NIHIDRINA obteve-se a coloração ROXA.
No tubo 2 foi usado 1 ml de H2O; e 5 gotas de Nihidrina, obteve-se a coloração transparente o que nos garante que no tubo 2 não há aminoácidos.
A Nihidrina é um composto que reconhece aminoácidos livres, ela se fixa e da uma coloração roxa na reação, porem, a Nihidrina não é capaz de reconhecer a proteína e nem mesmo o peptídio.

2) REAÇÃO DE BURETO:
Foi utilizado 2 tubos de ensaio nesta reação:
No tubo 1 foi colocado 1 ml de PROTEÍNA, 0,5 ml de NaOH; 0,5 ml CuSO4, obteve-se a coloração ROXA.
No tubo 2 foi colocado 1 ml de H2O destilada; 0,5 ml de NaOH; 0,5 ml de CuSO4, obteve-se a coloração azul claro.
O CuSo4 reconhece no mínimo 2 ligações peptídicas, esse reagente se complexa nas ligações peptídicas dando a coloração ROXA. No tubo 2, não existe ligação peptídica e o CuSO4 possui a cor azulada, no entando ele manteve a coloração.
3) REAÇÃO DE ESPECIFICIDADE ENZIMA-SUBSTRATO:

Foi utilizado 2 tubos de ensaio nesta reação:

No tubo 1 foi colocado 2 ml de TIOURÉIA; 1 ml de UREASE; 5 gotas de VERMELHO DE FENOL e obteve-se a coloração amarelo.

No tubo 2 foi colocado 2 ml de URÉIA; 1 ml de UREASE; 5 gotas de VERMELHO DE FENOL, e obteve-se a coloração rosa.
A uréia e a tiouréia são um substrato, a uréase é uma enzima. A especificidade faz com que a enzima reconheça um substrato exclusivo, assim ela muda o pH. Foi utilizado 1 indicador de pH chamado vermelho de fenol. No meio básico o vermelho de fenol da a coloração rosa e em meio ácido/ neutro ele resulta na coloração amarelo.
No tubo 1 o substrato