Microscopia Eletr Nica De Varredura

Preparação de amostras para Microscopia
Eletrônica de Varredura
(MEV)

Microscopia Eletrônica de
Varredura
O É um tipo de microscópio eletrônico capaz de

produzir imagens de alta resolução da superfície de uma amostra.

Grão de pólen
Fonte fig. https://pt.wikipedia.org/wiki/Microsc%C3%B3pio_eletr%C3%B4nico_de_varredura#/media/File:Misc_pollen.jpg Microscopia Eletrônica de
Varredura
O MEV
O Mais versátil instrumento para avaliação, exame e

análise das características micro estruturais de amostras biológicas e não-biológicas.

Fonte fig. www.futurelabs.co.in

Etapas de preparação para
MEV
Coleta, seleção e limpeza

Fixação
Desidratação
Ponto Crítico

Montagem e metalização
Conservação das amostras
Condições de observação no MEV

Coleta, seleção e limpeza
O Como princípio básico, a amostra deve ser

representativa da situação a ser analisada;
O As amostras devem possuir a dimensão

mínima necessária para o estudo.

Fixação
O Conservar a integridade da amostra;
O Física:
O Secagem ao ar;
O Criofixação:

O Química:
O Aldeídos fórmico e glutárico;
O Acroleína;
O Tetróxido de ósmio.

Fixação
O Soluções tampão
O Fosfato e cacodilato ( + utilizados)
O Boa fixação
O Manutenção do pH das soluções fixadoras.
O Sabe-se que tecidos fixados em soluções fixadoras

não tamponadas sofrem profundas alterações:
O Acidificação

O responsável por modificações na estrutura de

proteínas.

Fixação
O Soluções tampão
O Tampão cacodilato
O pH de tamponamento máximo se encontra na

faixa de 6,4 a 7,4

O Vantagens na fixação de materiais biológicos:
O Ausência de íons fosfato que possam interferir

em estudos citoquímicos;
O Preservação da atividade de determinadas enzimas; O Resistência à contaminação por bactérias.

O Desvantagem:
O Contém arsênio em sua composição!

Fixação
O Soluções tampão:
O Tampão fosfato:
O Vantagens:
O Considerado o tampão mais fisiológico porque é encontrado em células na forma de fosfatos inorgânicos e éster de fosfato.
O O pH de tampões fosfato apresenta