Isolamento de fungos

Isolamento de Fungos

O isolamento de fungos pode ser feito diretamente a partir de algum substrato ou de um compartimento ambiental (ar, água, solo), utilizando vidraria (tubos de ensaio, placas de petri) e instrumentos (estiletes, pinças, agulhas) esterilizados, com a manipulação em uma zona de segurança próximo a uma chama e/ou em uma câmara de fluxo laminar. Para que ocorra o isolamento dos fungos, é necessário oferecer condições propícias para o desenvolvimento dos mesmos. O isolamento pode ser realizado a partir de câmaras úmidas (recipiente semi-fechado com fonte de umidade (ex. placas de petri forradas com papel filtro embebido com água destilada estéril) ou a partir de um meio de cultura sólido ou líquido, semi-sintético ou sintético (ex. tubos de ensaio ou placas de petri contendo meio de cultura).

Protocolos das técnicas

Placa de solo:

1. Identificar a placa de petri (data, nome da técnica, nome do grupo)
2. Flambar as bordas de uma placa de petri esterilizada
3. Abrir a placa de petri e colocar, com uma espátula, uma quantidade bem pequena de solo na placa de petri
4. Colocar 1 ml de água destilada esterilizada e misturar, com movimentos circulares, a porção de solo com a água
5. Verter meio de cultura com antibiótico, ainda líquido, a uma temperatura aproximada de 40°C, sobre a placa de petri com a solução de solo
6. Espalhar o meio de cultura, fazendo movimentos circulares com a placa de petri
7. Tampar imediatamente a placa de petri
8. Flambar as bordas da placa de petri

Diluição de solo

1. Identificar as placas de petri (data, nome da técnica, nome do grupo)
2. Retirar o capuchão de um tubo de ensaio esterilizado com 9 ml de água destilada
3. Flambar a abertura do tubo de ensaio
4. Colocar 1 g de solo no tubo de ensaio com uma espátula
5. Repetir o passo 3
6. Fechar o tubo de ensaio com o capuchão
7. Agitar o tubo de ensaio para homogeneizar a solução de solo
8. Identificar o tubo de ensaio, marcando 1:10
9.