UREASE NA SOJA

Universidade Federal do Paraná – Setor Palotina
Bioquímica e biofísica geral – Prática
Medicina Veterinária 1º periodo

18 de outubro de 2013

Caracterização da enzima urease da Soja

Introdução

As enzimas são proteínas especializadas em catalisar reações biológicas, ou seja aumentam a velocidade de uma reação química sem interferir no processo. Elas estão associadas a biomoléculas, devido as suas extraordinária especificidade e poder catalítico (GALLO, 2002).
A uréia é o principal fertilizante sólido no mercado mundial. No Brasil esse produto responde por cerca de 60% dos fertilizantes nitrogenados comercializados. Há uma clara preferência da indústria pela fabricação da uréia em comparação com outras fontes sólidas de nitrogênio devido ao menor custo e maior facilidade de produção.
A reação de hidrólise consome prótons (H+) e provoca a elevação do pH ao redor das partículas; assim, mesmo em solos ácidos, a uréia está sujeita a perdas de N por volatilização de NH3 (OVERREIN & MOE, 1967).
A enzima urease, responsável pela hidrólise da uréia, é comum na natureza e está presente em microrganismos, plantas e animais. A urease presente nos solos é proveniente da síntese realizada por microrganismos e, provavelmente, também de origem em resíduos vegetais (BREMNER E MULVANEY, 1978; FRANKENBERGER E TABATABAI, 1982; PAULSON E KURTZ, 1969).
Os objetivos desta aula são demonstrar a natureza protéica da enzima, determinar qualitativamente a atividade enzimática de uma enzima, demonstrar a desnaturação proteíca, exemplificar a inibiçãoo enzimática e demonstrar a especificidade da ação enzimática.

Material e Métodos

-Estante para tubos de ensaio
- Seis tubos de ensaio
-Pipetas
-Pipetadores
-Água destilada
- Solução de Urease
-Reativo do Biureto
- Tampão fosfato 1 mmol/L, ph 7, contendo 1% de uréia
- Tampão fostato 1 mmol/L, ph 7, sem uréia
- Tampão fosfato 1 mmol/L, ph 7, contendo 1% de tiouréia
-Incubadora de aquecimento
- Vermelho de fenol