Técnicas de contagem pour plate e spread plate

FUNDAÇÃO UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO
FAET – FACULDADE DE ARQUITETURA, ENGENHARIA E TECNOLOGIA
DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA SANITÁRIA E AMBIENTAL

DISCIPLINA: Microbiologia Geral
PROFESSOR: Dr. Eduardo Beraldo de Morais

TÉCNICAS DE CONTAGEM POUR PLATE E SPREAD PLATE

Isabella Moreschi

Cuiabá– MT
Novembro/2010
1. INTRODUÇÃO

Na microbiologia, são utilizados vários tipos de técnicas para mensurar o crescimento microbiano, desde uma lâmina de microscópio escalonada até aparelhos eletrônicos sofisticados que contam o número de células em uma suspensão. Os dois métodos quantitativos mais utilizados são os que avaliam o número de células e aqueles que medem o peso celular. O crescimento também pode ser determinado pelas medidas das quantidades dos vários constituintes (RNA, DNA, proteína, etc) presentes, assim como a quantidade de certos produtos metabólicos. Algumas técnicas têm sido combinadas com outras que identificam os microrganismos, como a coloração fluorescente, para desenvolver instrumentos que fazem a contagem do número de patógenos em uma espécie.
Um dos procedimentos mais utilizados em laboratório para medida de crescimento microbiano é a contagem de viáveis, também conhecido como contagem em placa. Esse procedimento nada mais é do que a estimativa do número de células viáveis (isto é, capazes de se reproduzir) em uma amostra. Esta metodologia envolve a coleta de alíquotas de uma cultura microbiana em diferentes tempos de crescimento, as quais são então inoculadas em meio sólido. Após a incubação dos meios, geralmente por uma noite, o número de colônias é contado. Como uma colônia normalmente é originada a partir de um organismo, o total de colônias que se desenvolvem no meio corresponde ao número de células viáveis presentes na alíquota analisada. Esta técnica deve sempre realizada empregando-se várias diluições das amostras. A contagem de viáveis pode ser feita pela plaqueamento em superfície (spread plate) ou em profundidade (pour