Pour-Plate Spread Plate

Técnicas de contagem: Pour Plate e Spread Plate

1)INTRODUÇÃO

Na microbiologia, são utilizados vários tipos de técnicas com o intuito de definir o tamanho do crescimento microbiano. O método mais viável de ser utilizado é o método de contagem, que é a quantificação de apenas células vivas. Para realizar a contagem total de bactérias é necessário que seja feito diluições decimais seriadas da amostra e inocula-las usando a técnica de Pour-Plate ou Spread-Plate em meios de cultura adequados fazendo a contagem de número de colônias.
No método de Pour-Plate transfere-se 1ml da amostra com os microrganismos na placa de Petri vazia e por cima colocar de 10-20 ml do meio fundido sobre a cultura homogeneizando suavemente com movimentos circulares. Já na técnica de Spread-Plate transfere-se 0,1 ml da cultura para o meio sólido da placa e depois é colocado na placa os microrganismos por cima do meio sendo espalhados com o auxilio da alça de Drigalsky.

2) OBJETIVO

O objetivo deste experimento é realizar a contagem de microorganismos presentes na amostra através da técnica de plaqueamento em profundidade (Pour Plate) e técnica de espalhamento (Spread Plate).

3) MATERIAIS E MÉTODOS

3.1) MATERIAIS

Placas de Petri
Tubos Falcon
Swab (estéril)
Micropipetas de 0,1mL e 1mL
Microondas
Bico de Bunsen

3.2) MÉTODOS

Na realização deste experimento, trabalhou-se nas proximidades do Bico de Bunsen, denominada zona estéril. Foram utilizados dois métodos de contagem microbiana: o Pour Plate e o Spread Plate.
Primeiramente, foi coletada uma pequena amostra de solo do tipo grama.
Realizou-se a diluição seriada da amostra, com o intuito de deixar mais visível a estimativa do número de UFCs, uma vez que, à medida que a amostra é diluída, o número de microrganismos podem ser observados mais facilmente. Para a diluição seriada, utilizou-se 6 Tubos Falcon, sendo 4 deles contendo 9,9g de salina para as medidas de , , e e os outros 2 contendo 9g de salina