Relatorio

CENTRO UNIVERSITÁRIO HERMÍNIO OMETTO
UNIARARAS

73????- Carla Luiza Prado

ESTRESSE OXIDATIVO: TBARS E TIOL
BIOMEDICINA - 4º PERÍODO

Trabalho apresentado à disciplina de Bioquímica Funcional do curso de
Biomedicina do Centro Universitário
Hermínio Ometto.

Profo. Mst. Acácio Antônio Pigoso
Profo. Mst. Marcos Vergílio Corrêa da Silva

ARARAS/SP
Novembro/2013

1. INTRODUÇÃO
O estresse oxidativo pode ser definido como o desequilíbrio entre a formação e remoção de agentes oxidantes no organismo, decorrente da geração excessiva de espécies reativas de oxigênio (EROs) e/ou diminuição de antioxidantes endógenos.
Os radicais livres, como o ânion superóxido, hidroxila, alcoxila, peroxila, hidroperoxila, são quaisquer espécies químicas que contenham um ou mais elétrons não emparelhados em seu orbital eletrônico mais externo, ao passo que as EROs são quaisquer espécies oxidantes altamente reativas, inclusive os radicais livres. Exemplos de EROs não radicalares são o peróxido de hidrogênio, ácido hipocloroso, ozônio, oxigênio singlet e peróxidos lipídicos: todos capazes de induzir a produção de radicais livres no nosso organismo. - OGA, S; Fundamentos de toxicologia, 3ª ed., Editora Atheneu, São Paulo, 2008.

2. OBJETIVO
Avaliar o estresse oxidativo através dos testes TBARS e oxidação dos grupos sulfidrila (TIOL).

3. MATERIAIS E MÉTODOS
Materiais:
- plasma sanguíneo;
- H3PO4 20%;
- n-butanol,
- TBA;
- NaOH 50 mM;
- banho-maria à 37º;
- centrífuga;
- espectrofotômetro.
- tampão TRIS HCl com EDTA;
- DTNB
Métodos para TBARS:
Misturou-se 0,5 ml de amostra com 1ml TBA 1%, em seguida adicionou-se 0,5 ml de H3PO4 20% e deixou em banho-maria por 20 minutos, resfriou-se e depois adicionou-se 3 ml de n-butanol e agitou-se, depois centrifugou-se por 5 minutos (2000 rpm) e retirou-se a fase orgânica, a qual foi levada ao