MÉTODOS PARA DOSEAMENTO DE PECTINA E VIT. C

DOSEAMENTO DE PECTINA TOTAL E SOLÚVEL

Extração da Pectina Solúvel:
- pesar x g da amostra, colocar em um erlenmayer de 250mL, acrescentar 40 mL de álcool etílico 95%.
- Agitar por 1 hora, deixar 30 minutos em repouso.
- Filtrar, lavar a polpa vezes com álcool etílico 70% (± 30mL) para cada vez.
- Filtrar, desprezar o filtrado, lavar o resíduo do papel de filtro com 50 mL de água destilada num erlenmayer.
Extração da Pectina Total:
- Pesar x g da amostra em erlenmayer de 250mL. Acrescentar ±40mL de álcool etílico a 95%.
- Agitar por 1 hora, deixar 30 minutos em repouso.
- Filtrar, desprezar o filtrado, lavar o resíduo (polpa), do papel de filtro 2 vezes com álcool etílico 70% (±30mL para cada vez).
- Filtrar, desprezar o filtrado. Lavar o resíduo novamente em erlenmayer com 90 mL de versene 5%.
- Ajustar o pH com o NaOH 1 N (= ou 2,5mL) para 11,5 e aguardar 30 minutos.
- Em seguida, voltar o pH para 5,0 - 5,5 com ácido acético concentrado, colocar uma “pitada” de pectinase (±0,1g).
- Levar ao agitador por 1 hora, filtrar e completar o volume para 100mL. Se necessário, usar 0,1mL desta solução para o doseamento.

FUNDAMENTO:
FORMAÇÃO DE PRODUTO DE CONDENSAÇÃO, COLORIDO POR REAÇÃO DE PECTINA HIDROLIZADA (ATÉ GALACTURÔNICO COM CARBAZOL).

CURVA PADRÃO:
100mg de ácido galacturônico / 100mL de água destilada.
- Pegar 2,5mL da solução e diluir para 100mL de água destilada.

Amostra:
Diluir a amostra de modo que, usando 1,0 ml da solução, a densidade ótica (D.O) lida caia dentro da curva padrão (amostra + tetraborato + Carbazol).

Técnica – curva padrão

Colocar os tubos em banho-maria de gelo e adicionar lentamente a solução padrão, agitando os tubos levemente para não haver aquecimento, completar com água destilada.
Agitar os tubos, vagarosamente e colocar em banho-maria por 10 minutos.
Esfriar os tubos em banho de gelo e adicionar o carbazol.
Agitar os tubos evitando o aquecimento e coloca-los em banho-maria por 15 minutos.
Fazer