Microscopia

Citologia e Histologia Geral

MICROSCOPIA

Métodos de estudo

MICROSCOPIA
ÓPTICA (de luz)

1

Resolução:
Menor distância para que duas partículas apareçam como objetos separados

Abertura numérica das objetivas e limite de resolução conseguido com os microscópios utilizados nas aulas práticas de Citologia e Histologia Geral.

Características

LR = K (0,61) X λ (comp. de onda = 0,55)
AN (na objetiva)

Objetiva de imersão Limite de resolução (μm)

4x
40x
0,10
3,36

10x
100x
0,25
1,34

40x
400x
0,65
0,52

100x
1000x
1,25
0,27

Distância entre objetiva e o espécime (mm)

29,0

6,30

0,53

0,29

Ampliação da objetiva

Limite de Resolução:

Lentes objetivas “a seco”

Ampliação total*
Abertura numérica (AN)

Maior A.N. = Menor L.R. = ↑ resolução.

Células da bochecha (sem corantes)

Cloroplastos em espiral
(alga verde)

TÉCNICAS
Microscopia de luz:

Etapas:
Coleta
Fixação

Observação à fresco.
Preparação de material permanente.

Desidratação
Clareamento ou Diafanização
Inclusão
Corte
Montagem e Coloração
Interpretação dos cortes histológicos

2

Corte

micrótomo

3

Coloração:
• Estrutura de natureza básica corante ácido = estrutura acidófila.

→

• Estrutura de natureza ácida corante básico = estrutura basófila.

→

Variedades de microscópio de luz:
Contraste de fase (visualização de tecidos vivos).

Variedades de microscópio de luz:
Polarização (luz polarizada = moléculas longas).

Variedades de microscópio de luz:
Fluorescência (radiação ultra-violeta).

4

Variedades de microscópio de luz:
Confocal (raio laser gera imagens).

microfilamentos de actina + núcleo

microfilamentos

microtúbulos

Epitélio ciliado da traquéia

células vegetais em diversas fases da mitose

5

células do sangue

artéria muscular

pele humana

MICROSCOPIA
ELETRÔNICA
DE
DE
TRANSMISSÃO

6

Etapas:
Coleta
Fixação
Desidratação
Inclusão