hidrolise enzimática do amido

Hidrólise Enzimática do Amido

Objetivos: Demonstrar a hidrólise enzimática do amido

Objetivos específicos:
• Demonstrar que um polissacarídeo pode ser hidrolisado com a produção de açúcares redutores.
• Verificar através de reações especifica o desaparecimento do amido e concomitante o aparecimento de açúcares redutores durante o curso da hidrólise.

Fundamentação: O amido pode ser hidrolisado por enzimas denominadas amilases e glicosidases, dentre estas a amilase salivar. A hidrólise do amido forma intermediária de pesos moleculares mais baixos chamados dextrinas, sendo os produtos finais da ação enzimática a maltose e a glicose.

Procedimentos:
Curva de calibração para dosagem de açúcar
1. Organizou-se uma bateria com seis tubos de ensaio
2. Identificou-se cada tubo com os números de 1 a 6
3. Adicionaram-se os reagentes conforme a tabela abaixo:
TUBO GLUCOSE 2 mg/mL ÁGUA DESTILADA
1 (branco) - 1,5 mL
2 0,1 mL 1,4 mL
3 0,2 mL 1,3 mL
4 0,4 mL 1,1 mL
5 0,8 mL 0,7 mL
6 1,0 mL 0,5 mL

4. Em cada tubo adicionou-se 1,0 mL do reativo de Benedict.
5. Colocaram-se os tubos de ensaio em banho-maria para ferver durante 5 minutos.
6. Realizaram-se a leitura das absorbâncias no espectrofotômetro a 540 nm e anotaram-se as absorbâncias.
- Traçou-se um gráfico colocando as concentrações na abscissa e as absorbâncias na ordenada
Modo de Preparo do Reativo de Benedict: O reativo de Benedict é utilizado para detectar a presença de glicídios redutores, nos quais se incluem glicose, galactose, lactose, maltose e manose.
Dissolver 85 g de citrato de sódio e 50 g de carbonato de sódio anidro em cerca de 350 mL de água quente. Dissolver a parte, em 50 mL de água quente (~80ºC), 0,5 g de sulfato de cobre. Transferir lentamente, com agitação constante, a solução cúprica sobre a primeira. Completar o volume a 500 mL de água. Filtrar se necessário. Guardar em frasco âmbar e validade de 2 meses.

Hidrólise enzimática do amido
Reagentes:
- solução de