Extração de dna

Verificação pratica no laboratório
Aula Pratica de Ácidos Nucleicos – Extração de DNA

Os estudos foram dados a partir das informações a seguir :
Objetivos

• Conhecer os princípios básicos da extração do material genético do vegetal, a partir dos tecidos deste vegetal.
• Obter ácido desoxirribose (DNA) a partir de vegetais.
• Visualizar DNA isolado.
• Conhecer um pouco sobre as diferentes técnicas de extração de DNA usadas em pesquisas e medicina forense.
• Observar a estrutura do DNA no microscópio óptico com a objetiva de 40.

Metodologia

Material
• Banana, cebola, kiwi, flor de hibisco, tomate e lentilha.
• Liquidificador
• Placa de petri
• Becker de 400 ml
• Microscópio óptico
• Lamina
• Lamínula
• Estilete
• Tubos de ensaio
• Estante para tubo de ensaio
• Sal de cozinha
• Detergente neutro
• Álcool etílico 95% gelado (-10*C)
• Bastão fino de vidro ou madeira bastão ou palito de churrasco
• Funil
• Gase para filtrar
• Gelo

Solução tampão:
• 180 ml de água fervida
• 10 ml de detergente
• 2 colher de chá de sal (NaCl)
Misture tudo em um béquer

Protocolo de procedimento
• Pique o vegetal em pedaços de 0,5 cm, coloque a solução tampão, Coloque a mistura no liquidificador. Coloque o vegetal picadão, bata até ficar uma mistura homogênea.
• Deixe a mistura descansar no gelo durante 5 min, depois observe.
• Filtra a mistura no funil com uma gase aberta, recolhendo o filtrado em um tubo de ensaio limpo.

• Derramar vagarosamente o álcool gelado nas bordas do tubo de ensaio com a mistura filtrada até formar uma camada de 2 a 3 cm de álcool sobre a mistura. Forma-se duas fases, a superior, alcoólica, e a inferior, aquosa.
• Após alguns instantes, o DNA começará a aparecer junto com as bolhas e poderá ser ‘’pescado’’ com o garfo ou colher.
• Formam-se fios esbranquiçados, que são aglomerados de moléculas de DNA.
• Mergulhe o bastão no copo e com movimentos circulares misture as fases.

Informações técnicas:
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