Eletroforese

400 palavras 2 páginas
Relatório
Eletroforese é uma técnica analítica utilizada para analisar macromoléculas, tais como proteínas e ácidos nucléicos. O efeito eletroforético se baseia na teoria de Debye-Hückel-Onsager, onde a teoria de dissociação eletrolítica propõe o fato de que as partículas carregadas moverem-se de acordo com a influência das forças eletrostáticas para um eletrodo de carga oposta, quando se é aplicada uma diferença de potencial em uma solução contendo eletrólitos.
Suporte
Os suportes mais utilizados para a técnica de eletroforese são os géis de poliacrilamida para proteínas, e gel de agarose para ácidos nucléicos, porque estes compostos agem como uma peneira molecular, ou seja, separam as espécies em função de sua massa/tamanho molecular, inibindo a propagação do calor em virtude do atrito causado pela migração e pela aplicação do campo elétrico.
Métodos da Eletroforese
1 – A amostra contendo as macromoléculas devidamente desnaturadas e reduzidas é distribuída ao nos poços ou cavidades do gel de suporte;
2 - Após a distribuição o equipamento é fechado e o campo elétrico é aplicado no gel, através de um dispositivo diferencial de energia elétrica e as macromoléculas vão sendo distribuídas pela extensão do gel e são separadas em função de sua massa e tamanho molecular que são os principais fatores que determinam a mobilidade eletroforética.
No topo do gel existe uma mistura de macromoléculas de variados tamanhos e massas moleculares de modo que quando o campo elétrico é aplicado as moléculas menores migram primeiro, pela malha formada pelo gel. Ao passo que durante a distribuição o gel funciona como uma peneira molecular e as moléculas com massa molecular mais elevada vão sendo retidas ao longo do processo pelas malhas gel, o que permite que as macromoléculas sejam analisadas pela sua massa molecular. No final do processo, quando todas as macromoléculas estão ditribuidasm, o gel é mergulhado em uma solução corante. Para proteínas são usadas solução de

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